環(huán)磷酰胺與細(xì)胞毒性T細(xì)胞聯(lián)合免疫治療B16黑色素腫瘤.pdf

1、黑色素瘤是一種來源于黑色素細(xì)胞的惡性皮膚癌癥，其具有發(fā)病率低，致死率高等特點(diǎn)。目前，臨床上主要還是通過化療和放療治療黑色素瘤。近年來有多種免疫療法引入黑素瘤治療，包括疫苗療法、過繼回輸 T細(xì)胞療法、細(xì)胞因子與靶標(biāo)藥物療法等等。其中過繼回輸T細(xì)胞療法治療黑色素瘤已在臨床上得到應(yīng)用，過繼回輸T細(xì)胞療法是指從腫瘤組織中獲取腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞，然后將細(xì)胞回輸?shù)讲∪梭w內(nèi)進(jìn)行治療。但是這種獲得細(xì)胞的方法成本較高，迫切需要一種合適的的能夠在體外獲得大量

2、的腫瘤特異性的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的方法。在腫瘤微環(huán)境中存在大量的具有免疫抑制性的細(xì)胞與細(xì)胞因子，它們會(huì)抑制體外回輸?shù)募?xì)胞毒性T細(xì)胞使其無法進(jìn)入腫瘤中發(fā)揮治療作用，導(dǎo)致單純的細(xì)胞回輸治療腫瘤效果不明顯。需要將免疫療法與化療方法相結(jié)合，在回輸細(xì)胞前先用化療藥物降低腫瘤微環(huán)境的免疫抑制作用，從而增強(qiáng)治療黑色素瘤的效果。
　　本課題是使用B16腫瘤細(xì)胞裂解液作為抗原，在體外通過低劑量的細(xì)胞因子IL-2與腫瘤細(xì)胞裂解抗原刺激脾臟細(xì)胞激活，使

3、用該方法在體外培養(yǎng)脾臟細(xì)胞4-5天，即可以獲得由脾臟細(xì)胞增殖來的大量具有腫瘤特異性殺傷效應(yīng)的細(xì)胞毒性 T細(xì)胞。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)激活的T細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷效率，發(fā)現(xiàn)當(dāng)效靶細(xì)胞比例50:1的時(shí)候，殺傷效率就可以達(dá)到60％。同時(shí)對(duì)脾臟細(xì)胞具有較低的殺傷效率，證明這種方法獲得激活的T細(xì)胞具有很好的腫瘤特異性殺傷效應(yīng)。
　　將體外激活的T細(xì)胞與環(huán)磷酰胺化療藥物聯(lián)合治療黑色素瘤，低劑量的環(huán)磷酰胺可以剔除免疫抑制性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，本課題選用1