禹州漏蘆誘導(dǎo)人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究中藥禹州漏蘆(RadixEchinopsis)對(duì)人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266的誘導(dǎo)凋亡作用并初步探究其誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制。為多發(fā)性骨髓瘤的治療尋找一種有效低毒的中草藥抗腫瘤制劑，有助于新藥的開發(fā)和應(yīng)用。
　　方法：采用血清藥理學(xué)的方法模擬禹州漏蘆在體內(nèi)發(fā)生的藥物效應(yīng)；首先將購得的禹州漏蘆原藥材利用醇提法制備不同濃度禹州漏蘆粗提液（4g/ml，2g/ml，1g/ml），后分別灌胃大鼠，一定時(shí)間后腹主動(dòng)脈采血，無菌分離血清，并將

2、不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用于人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞株；Hoechst33258染色后激光掃描共聚焦顯微鏡觀察不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后U266細(xì)胞凋亡形態(tài)；AnnexinV/PI雙染后采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后的細(xì)胞凋亡率；HDAC活性/抑制直接分析試劑盒（比色法）檢測不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后骨髓瘤細(xì)胞內(nèi)組蛋白去乙?；福╤istonedecetylase,HDAC）的活性及其抑制率。
　　

3、結(jié)果：
　　1將不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞48h后在激光掃描共聚焦顯微鏡下可觀察到處于不同凋亡進(jìn)程中的細(xì)胞，且中濃度組和高濃度組可見凋亡小體。
　　2流式細(xì)胞儀檢測禹州漏蘆含藥血清誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡作用具有濃度、時(shí)間依賴性，且高濃度禹州漏蘆含藥血清可顯著誘導(dǎo)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞凋亡(P＜0.001)。
　　3HDAC活性/抑制試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用于人骨髓瘤U266細(xì)胞后，可檢測