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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究辛二酰苯胺異羥肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266細(xì)胞增殖和凋亡的影響,并探討其可能機(jī)制。
方法:采用臺(tái)盼藍(lán)拒染法、四氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)SAHA對(duì)U266細(xì)胞增殖的影響;Hoechst33342染色檢測(cè)凋亡細(xì)胞的形態(tài);AnnexinV和PI染色后應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)SAHA作用U266細(xì)胞的凋亡率;Western-blot方法檢測(cè)組蛋白
2、H3乙酰化水平、細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶抑制劑p21蛋白表達(dá)水平以及p38MAPK信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:臺(tái)盼藍(lán)拒染法和四氮唑藍(lán)(MTT)比色法均顯示,SAHA可明顯抑制U266細(xì)胞增殖,且具有時(shí)間劑量依賴性;Hoechst33342染色在熒光顯微鏡下可見(jiàn)SAHA處理組細(xì)胞胞核出現(xiàn)明顯的核固縮、核碎裂的情況,出現(xiàn)較多量的凋亡細(xì)胞;利用AnnexinV/PI雙標(biāo)法經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度的SAHA(0.5、1、2、4
3、umol/L)作用U266細(xì)胞凋亡率24h分別為(2.83±0.87)％、(10.00±0.87)％、(18.97±1.19)％和(31.47±1.66)％,48h分別為(10.37±0.65)％、(24.33±2.11)％、(30.37±2.97)％和(57.7±2.45)％,呈時(shí)間劑量依賴性。Western-blot結(jié)果顯示U266細(xì)胞經(jīng)SAHA處理后,U266細(xì)胞組蛋白H3乙酰化水平及p21蛋白表達(dá)水平升高,呈現(xiàn)時(shí)間劑量依賴性。p
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