廣西三黃雞禽白血病的凈化及分離毒株致病性研究.pdf

1、禽白血病(avian leukosis，AL)是指由反轉(zhuǎn)錄病毒科禽反轉(zhuǎn)錄病毒屬禽白血病病毒(avian leukosis virus，ALV)引起的以禽類造血組織中一些細(xì)胞成分大量增生而導(dǎo)致的一類傳染性腫瘤疾病。根據(jù)病毒包膜蛋白的抗原性差異、病毒干擾實(shí)驗(yàn)、宿主范圍等生物學(xué)特性，ALV主要被分為A-J共10個(gè)亞群以及2012年新發(fā)現(xiàn)的K亞群。AL主要引起雞群生長、產(chǎn)蛋率等生產(chǎn)性能降低以及腫瘤發(fā)生，同時(shí)還會引起感染雞機(jī)體抵抗力下降和免疫抑制

2、，給養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。近年來各地方品系雞群中不同程度的各亞群混合感染比較普遍，這不僅可導(dǎo)致致病性更強(qiáng)，還有可能造成病毒的重組，給AL的防控帶來更大的挑戰(zhàn)。目前還沒有用于預(yù)防和治療AL的有效疫苗和藥物，疾病的防控主要是通過種群凈化。廣西是我國地方品種雞資源最豐富的省份之一，有許多優(yōu)良的地方品系已得到很好的繁育和商業(yè)開發(fā)利用，白血病的凈化工作就顯得非常重要。
　　本研究選擇比較有特色的地方優(yōu)勢品種三黃雞為研究對象，選擇目前生產(chǎn)

3、量最大的DGGX4公司的三黃雞配套系的A、B、C三個(gè)純系的種群開展凈化工作。實(shí)施以逐個(gè)個(gè)體檢測以及淘汰陽性個(gè)體、選留陰性個(gè)體繁育，實(shí)施嚴(yán)格生物安全措施防止種蛋污染及其后代雞的水平感染，杜絕疫苗污染等為主要措施的凈化方案，經(jīng)過8個(gè)世代的連續(xù)凈化，A、B、C三個(gè)純系種群母雞樣品ALV-p27抗原陽性率分別由零世代的44.36％、8.14％、7.9％下降至七世代的0.80％、0.91％、0.94％;公雞分別由零世代的肛拭p27抗原陽性率45.

4、36％、17.50％、15.45％下降至七世代的ALV分離陽性率1.46％、2.64％、1.64％;七世代時(shí)A、B、C三個(gè)系的ALV-A/B抗體陽性率分別下降至4.34％、2.17％、3.26％，ALV-J抗體陽性率也下降至6.52％、5.43％、6.52％，凈化工作有效，凈化效果理想。
　　課題通過利用臨床病例分離獲得的ALV對1日齡三黃雞進(jìn)行腹腔接種，研究J亞群ALV（ALV-J）單獨(dú)感染及三個(gè)亞群ALV（ALV-M:ALV-

5、A、ALV-B和ALV-J）混合感染的致病性。結(jié)果兩組感染均成功復(fù)制到臨床的發(fā)病，病雞體型瘦弱且發(fā)育不良，雞冠蒼白，腳墊、肝臟、小腸漿膜、腎臟等處看到血管瘤，肝、脾腫大且表面有灰白色腫瘤結(jié)節(jié)，腎臟長出球型腫瘤。在雞的生長發(fā)育上表現(xiàn)出不同程度的抑制，從第5周開始感染組雞只的體重均極顯著低于未感染對照組(P＜0.01);免疫器官的發(fā)育均受到影響，感染雞胸腺比重在1W、5W、11W時(shí)均極顯著低于未感染對照組(P＜0.01)，法氏囊比重在1W時(shí)

6、均顯著高于未感染對照組(P＜0.05），脾臟比重在11W時(shí)均極顯著高于未感染對照組(P＜0.01);感染組雞只對NDV、AIV-H5和H9疫苗免疫的抗體應(yīng)答均表現(xiàn)不同程度的抑制;病理組織學(xué)檢查，肝組織間可見大量浸潤的淋巴細(xì)胞和髓細(xì)胞樣瘤細(xì)胞，腎臟腫瘤可見大量彌漫性增生的髓細(xì)胞樣腫瘤細(xì)胞，胞漿高度嗜酸性;血常規(guī)指標(biāo)檢測顯示，感染組的淋巴細(xì)胞數(shù)和白細(xì)胞數(shù)在21W時(shí)顯著低于未感染對照組(P＜0.05)，CD4+/CD8+T比值在11W時(shí)極顯著