冬棗黑點(diǎn)病病原物分子鑒定與致病機(jī)理初探.pdf

1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文冬棗黑點(diǎn)病病原物分子鑒定與致病機(jī)理初探姓名：于麗娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：劉大群;楊文香20070609M o l e c u l a r I d e n t i f i c a t i o no f t h e P a t h o g e n a n d M e c h a n i s m o f P a t h o g e n e s i so f t h eB l a c k - s p

2、 o t D i s e a s e o n Z i z y p h u s J u j u b ac v ．D o n g z a oA u t h o r ．Y uL i - h aS u p e r v i s o r s ：P r o f e s s o rL i u D a - q u nP r o f e s s o r Y s n g W e n - x i a n gM 8 j “P l a n t P a t h o

3、l o g yA b s 打a c tP a t h o g e n s i s o l a t e df r o mZ i z y p h u s J u j u b aC V ．D o n g z a o w c l ' e i d e n t i f i e da c c o r d i n g t ot h e i rm o l e c u l a r c h a r a e t e r i s f i ∞．T h et

4、 h r e ei s o l a t e s , C o n i o t h y r i u m f u c s i d u l u mS a e en a m e d a s9 4 ．P h o m a p o m i r u m T h f t m n a m e d a s9 5 ，A l t e r n a r i aa l t e r n a t a ∞．) K d s s l e r n a m e d 勰9 6 ，w e

5、 l ' ec l o n e da n ds e q u e n c e dw i t ht h e i n t e r n a lt r a n s c r i b e ds p a c e r ( I T S ) a n d5 ．8 Sr D N A u s i n g t h eu n i v e r s a l p r i l n e r 8 1 1 r S l a n d I T S 4 ．a(chǎn) n d w o r e

6、 c o m p a r e dw i t h p u b l i s h e ds e q u e n c e s i nG c n B a n k d a t a b a s e ．P h y l o g e n c t i ct r e e s w e r e p r o d u c e d b a s e d0 1 1 也e s e q u e n c e s w h i c hw e r e1 1 i g h i d e n

7、t i c a l t oI T Sa n d5 ．8 S r D N A s e q u e n c e s o fp a t h o g e n sf r o md i f f e r e n th o s t sa n dd i f f e r e n tp l a c e sb y s o f t w a r eM r B a y e s 3 ．0 b 4 ．T h er e s u l t s i n d i c a t e

8、dt h a tI T S s e q u e n c e so fp a t h o g e n9 4a n d 9 5w e r ec o m p l e t e l yi d e n t i t y , a n dw e r e9 7 ％i d e n t i c a lt oP h o m as p e c i e s ．T h e yw e r ei d e n t i f i e d 奶t l lo n e g e n e

9、r aP h o m a ．w h ow a sn a m e d a s9 5 ．T h e p h y | o g e n e t i ct r e e sm d i c a t e dt h a ti t i sc l o s e d r e l a t e d t oP h o m a g l o m e r a t a ．I T S a n d5 ．8 Sr D N A s e q u e n c e so fp a t h

10、o g e n y9 6W a s9 8 ％i d e n t i c a lt o A l t e r n a r i a a n dc l u s t e r e d ( 9 麟b o o t s t r a p ) w i t hs m a l l ．s o o r e d s p e d 髓w h o s em o m h o l o 西c a l c h a r a c t e r i s t i c s w e l '

11、; e s i m i l a r i n ac l a d e i np h y l o g e n e t i ct r e e s ，i n c l u d i n gA ．a(chǎn) l t e r n a t a , A ．t e n u i a s i m a ，Ab n # p e s ，A ．m a l i , a n dA ．a(chǎn) r b o r e s c e n & e ta 1 ．C o n s i d e r i

12、 n gi t s m o r p h o l o g i c a l i d e n t i f i c a t i o n , t h e p a t h o g e n9 6w a si d e n t i f i e d a sA l t e r n a r i a a l t e r n a t a @ ) K e i s s l c r ．1 1 ”p a t h o g e n so ft h eb l a c k - s

13、 p o t d i s e a s eZ i z y p h u sJ u j u b a 甌D o n g z a ow a s e x p l o r e dt h r o u g h c e l l - w a l ld e g r a d i n g 饑巧m 鶴㈣E s ) a n d t o x i n sp r o d u c e db yt h e p a t h o g e n s ．T h ec r u d eC W

14、 D E s w e r e p r o d u c e d i ni m p ∞v e dM a r c u s ’S m e d i u m i n d u d i n gd i f f e r e n ti n d u c e r st o i n d u c e d i f f e r e n t k i n d s o f C W D E s ．R e s u l t s i n d i c a t e d P o l y g

15、 a l a e t u r o n a s e ( P G ) ，c e l l u l a s e ( C x ) ，p e c t i nm e t h y l g a l a c t u r o n a s e ( P M G ) ，p o l y g a l a e t u r o n i c a c i d t r a n s - e l i m i n a s e口G T E ) ，a n d p e c t i n m

16、e t h y l t r a n s - e l i m i n a s e ( P M T E ) w o r o d e t e r m i n e di nt h e e l “ t i d e @ u z y n l 0 8 ．A m o n gt h e C W D E s ．t h e a c t i v i t i 鶴o fP Gw c T es i g n i f i c a n t l y h i g h e rt

17、h a n t h e o t h e r s ’．M e d i t m a o f D o n g z a o a si n d u c e f c o u l d i n d u c e P G o f h i g h a c t i f i f i e sa n d C x o f l o w a c t i v i t i e s 。w h i c hs h o w e ds t e r i l i z e dD o n g

18、z a oc o u l di n d u c ec e r t a i nm n o u n tC W D E s ，a n dt h e r ew e r el o t so f p e c t i na n d a l i t t l ec e l l u l o s ei nD o n g z a o h o s t , w h i c h b e n e f i t e d l o t so f P G a n da l i

19、t t l eC x p r o d u c e db y p a t h o g e n s ．S op a t h o g e n sp r o d u c e dm a n yk i n d so fC W D E s i n d u c e db yp 硎n a n d c e H 試o s e i n h o s t , w h i c h h e l p e d t h e m t 0i n v M e t h e h o