中藥桑葉質(zhì)量評(píng)價(jià)及活性部位的純化工藝研究.pdf

1、桑葉(FoLium Mori)是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材之一，含有多種功能性成分，如礦物質(zhì)、維生素、食物纖維、氨基酸、植物甾醇、黃酮類、生物堿類、多糖等，具有降血糖、降血壓、降低膽固醇、抗衰老、提高免疫力、抗菌、抗病毒、防癌等多種生理功能，已日益成為醫(yī)藥和食品領(lǐng)域研究熱點(diǎn)。本文對(duì)湖州市不同采摘時(shí)間、不同種植基地、不同品種、不同部位的桑葉進(jìn)行生物堿以及多糖類成分分析，同時(shí)對(duì)主要活性部位分離純化工藝進(jìn)行深入的研究，通過(guò)比較桑葉藥材的內(nèi)在品質(zhì)，分離桑

2、葉有效部位，為湖州桑葉開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。此外，還考察了分離純化得到的桑葉總生物堿浸膏對(duì)α-葡萄糖苷酶活力的影響以及其抑制作用類型，為桑葉降血糖作用研究提供參考。 1．桑葉中生物堿及多糖類成分的含量測(cè)定 目的：考察不同采摘時(shí)間、不同種植基地、不同品種及不同藥用部位桑葉中總生物堿、1-脫氧野尻霉素以及多糖類成分的含量差異。 方法：雷氏鹽比色法測(cè)定總生物堿的含量；HPLC-ELSD方法測(cè)定1-脫氧野尻霉素含量，以Agi

3、lent ZORBAX NH2(5um,4.6x250mm)柱為分離柱；流動(dòng)相：乙腈-水(80：20)；流速1.0mL.min-1；柱溫：30℃；ELSD氣化室溫度55℃：高純氮作載氣，壓力1.5Bar。苯酚—濃硫酸法測(cè)定總多糖的含量。 結(jié)果：冬季桑葉樣品中總多糖的含量普遍高于其它季節(jié)樣品，而生物堿類成分的含量隨季節(jié)變化無(wú)明顯規(guī)律；品種、種植基地以及采摘部位對(duì)桑葉中上述成分含量也有較大影響。 結(jié)論：桑葉中生物堿以及總多糖

4、的含量與種植基地、采摘時(shí)間、品種以及采摘部位等相關(guān)。 2．桑葉活性部位樹(shù)脂純化工藝 目的：研究分離、純化桑葉中主要活性部位黃酮、生物堿和多糖的工藝條件及參數(shù)。 方法：本文以殼聚糖作為絮凝劑對(duì)提取液進(jìn)行澄清處理，并對(duì)絮凝條件進(jìn)行優(yōu)化。采用柱層析連續(xù)分離的方法，絮凝液依次經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂和陽(yáng)離子樹(shù)脂，同時(shí)分離得到桑葉中的黃酮類、多糖類和生物堿類組份。本文以靜態(tài)飽和吸附量、靜態(tài)洗脫率、洗脫量為考察指標(biāo)，比較了不同型號(hào)的陽(yáng)離

5、子樹(shù)脂分離、純化桑葉總生物堿的工藝。又以各成分轉(zhuǎn)移率和各成分浸膏含量為指標(biāo)，對(duì)最佳大孔樹(shù)脂以及陽(yáng)離子樹(shù)脂吸附工藝條件進(jìn)行了篩選。 結(jié)果：殼聚糖對(duì)主要活性成分的轉(zhuǎn)移率高于傳統(tǒng)的醇沉工藝。Q2型陽(yáng)離子樹(shù)脂對(duì)生物堿類成分具有較好的吸附及洗脫參數(shù)，其飽和吸附量達(dá)到35.81mg.g-1干樹(shù)脂；經(jīng)過(guò)工藝條件優(yōu)選后，總黃酮轉(zhuǎn)移率和浸膏總黃酮含量平均值分別達(dá)到65.15％，71.86％；總生物堿轉(zhuǎn)移率和浸膏總生物堿含量平均值分別達(dá)到74.59

6、％，51.09％；總多糖轉(zhuǎn)移率和浸膏總多糖含量平均值分別達(dá)到69.94％，60.11％。 結(jié)論：R1型大孔樹(shù)脂以及Q2型陽(yáng)離子樹(shù)脂綜合性能較好，適用于桑葉中主要活性成分的分離純化。 3．桑葉生物堿浸膏對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制作用的體外研究 目的：初步研究從桑葉中提取分離得到生物堿類成分對(duì)α-葡萄糖苷酶活力的影響以及其抑制作用類型。 方法：本文以拜糖平(acarbose)為陽(yáng)性對(duì)照，采用α-葡萄糖苷酶體外抑制作