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文檔簡介
1、桑葉(FoLium Mori)是我國的傳統(tǒng)中藥材之一,含有多種功能性成分,如礦物質、維生素、食物纖維、氨基酸、植物甾醇、黃酮類、生物堿類、多糖等,具有降血糖、降血壓、降低膽固醇、抗衰老、提高免疫力、抗菌、抗病毒、防癌等多種生理功能,已日益成為醫(yī)藥和食品領域研究熱點。本文對湖州市不同采摘時間、不同種植基地、不同品種、不同部位的桑葉進行生物堿以及多糖類成分分析,同時對主要活性部位分離純化工藝進行深入的研究,通過比較桑葉藥材的內在品質,分離桑
2、葉有效部位,為湖州桑葉開發(fā)利用提供依據。此外,還考察了分離純化得到的桑葉總生物堿浸膏對α-葡萄糖苷酶活力的影響以及其抑制作用類型,為桑葉降血糖作用研究提供參考。 1.桑葉中生物堿及多糖類成分的含量測定 目的:考察不同采摘時間、不同種植基地、不同品種及不同藥用部位桑葉中總生物堿、1-脫氧野尻霉素以及多糖類成分的含量差異。 方法:雷氏鹽比色法測定總生物堿的含量;HPLC-ELSD方法測定1-脫氧野尻霉素含量,以Agi
3、lent ZORBAX NH2(5um,4.6x250mm)柱為分離柱;流動相:乙腈-水(80:20);流速1.0mL.min-1;柱溫:30℃;ELSD氣化室溫度55℃:高純氮作載氣,壓力1.5Bar。苯酚—濃硫酸法測定總多糖的含量。 結果:冬季桑葉樣品中總多糖的含量普遍高于其它季節(jié)樣品,而生物堿類成分的含量隨季節(jié)變化無明顯規(guī)律;品種、種植基地以及采摘部位對桑葉中上述成分含量也有較大影響。 結論:桑葉中生物堿以及總多糖
4、的含量與種植基地、采摘時間、品種以及采摘部位等相關。 2.桑葉活性部位樹脂純化工藝 目的:研究分離、純化桑葉中主要活性部位黃酮、生物堿和多糖的工藝條件及參數。 方法:本文以殼聚糖作為絮凝劑對提取液進行澄清處理,并對絮凝條件進行優(yōu)化。采用柱層析連續(xù)分離的方法,絮凝液依次經過大孔樹脂和陽離子樹脂,同時分離得到桑葉中的黃酮類、多糖類和生物堿類組份。本文以靜態(tài)飽和吸附量、靜態(tài)洗脫率、洗脫量為考察指標,比較了不同型號的陽離
5、子樹脂分離、純化桑葉總生物堿的工藝。又以各成分轉移率和各成分浸膏含量為指標,對最佳大孔樹脂以及陽離子樹脂吸附工藝條件進行了篩選。 結果:殼聚糖對主要活性成分的轉移率高于傳統(tǒng)的醇沉工藝。Q2型陽離子樹脂對生物堿類成分具有較好的吸附及洗脫參數,其飽和吸附量達到35.81mg.g-1干樹脂;經過工藝條件優(yōu)選后,總黃酮轉移率和浸膏總黃酮含量平均值分別達到65.15%,71.86%;總生物堿轉移率和浸膏總生物堿含量平均值分別達到74.59
6、%,51.09%;總多糖轉移率和浸膏總多糖含量平均值分別達到69.94%,60.11%。 結論:R1型大孔樹脂以及Q2型陽離子樹脂綜合性能較好,適用于桑葉中主要活性成分的分離純化。 3.桑葉生物堿浸膏對α-葡萄糖苷酶抑制作用的體外研究 目的:初步研究從桑葉中提取分離得到生物堿類成分對α-葡萄糖苷酶活力的影響以及其抑制作用類型。 方法:本文以拜糖平(acarbose)為陽性對照,采用α-葡萄糖苷酶體外抑制作
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