懷菊花降壓有效部位提取純化及質(zhì)量評價研究.pdf

1、目的：懷菊花是菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥頭狀花序，具有散風清熱、平肝明目之功效，為河南道地藥材四大懷藥之一，栽培歷史悠久，臨床應(yīng)用廣泛。本實驗通過觀察對自發(fā)性高血壓模型大鼠血壓的影響，篩選懷菊花中降壓有效部位；優(yōu)選該降壓有效部位最佳提取純化工藝條件；優(yōu)選該降壓有效部位薄層色譜條件，進行薄層色譜研究；優(yōu)選該降壓有效部位高效液相色譜條件并進行方法學(xué)考察，進行含量測定研究；對懷菊花中降壓

2、有效部位進行質(zhì)量標準研究。
　　方法：在實驗中，對懷菊花降壓有效部位的提取溶劑進行了考察，確定了最佳提取溶劑。通過正交試驗考察了乙醇濃度、乙醇用量、提取時間、提取次數(shù)等提取條件，確定了最佳提取工藝。通過薄層色譜法和高效液相色譜法考察了大孔吸附樹脂柱法純化和萃取法純化，確定了最佳純化工藝。在對懷菊花降壓有效部位的薄層色譜研究中，通過考察展開劑條件，對其進行了薄層色譜研究。在對懷菊花降壓有效部位的含量測定研究中，通過紫外分光光度法和可

3、見分光光度法對其中的總黃酮（以蘆丁計）進行了含量測定，采用高效液相色譜法同時對其中的隱綠原酸、綠原酸、新綠原酸、木犀草苷、3,4-O-二咖啡酰基奎寧酸、3,5-O-二咖啡?；鼘幩?、4,5-O-二咖啡酰基奎寧酸進行了含量測定，并進行方法學(xué)考察，確定了懷菊花降壓有效部位的質(zhì)量標準。在懷菊花總黃酮部位的藥理實驗研究中，通過在給藥后的第一天、第三天、第七天的第一小時、第二小時、第三小時、第四小時測量自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動脈收縮壓，測定了時

4、效關(guān)系；懷菊花總黃酮部位分別按高、中、低劑量組灌胃給藥，測量自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動脈收縮壓，測定了量效關(guān)系；按已測定的最佳劑量灌胃給藥兩周，測量自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動脈收縮壓，觀察懷菊花總黃酮部位對自發(fā)性高血壓模型大鼠的尾動脈收縮壓的影響。
　　結(jié)果：（1）懷菊花降壓有效部位的最佳提取溶劑為乙醇。最佳提取工藝為：80％乙醇作為提取溶劑，提取兩次，每次1h，第一次液料比為15:1，第二次液料比為10:1。（2）最佳純化工藝為

5、萃取法純化即：取濃縮液，加乙酸調(diào)至 pH=2左右，加乙酸乙酯1:1萃取兩次，合并乙酸乙酯層，加氫氧化鈉溶液調(diào)至 pH=7左右，回收乙酸乙酯，濃縮，減壓干燥。（3）薄層色譜研究結(jié)果顯示最佳展開劑為乙酸乙酯-甲酸-水（8:1:1），可檢視的特征斑點清晰，特異性強，且各斑點Rf值適中，可用于該提取物的定性鑒別。（4）紫外分光光度法和可見分光光度法測得懷菊花降壓有效部位中總黃酮含量分別為41.35%，48.98%。高效液相色譜法測得七種成分均線

6、性關(guān)系良好，平均回收率符合規(guī)定。該含量測定方法簡便、準確、重現(xiàn)性好，可用于該提取物的定量控制。（5）結(jié)果顯示最佳時效為給藥后第三天第四小時，最佳劑量為中劑量即0.41g/kg.d，懷菊花總黃酮能顯著性降低自發(fā)性高血壓大鼠的血壓，與模型對照組比較差異顯著。
　　結(jié)論：最終確定了合理、可行的懷菊花降壓有效部位提取純化工藝；研究結(jié)果表明其質(zhì)量控制方法簡便、準確度高、重復(fù)性好，可以有效地控制該提取物的質(zhì)量。懷菊花總黃酮能顯著性降低自發(fā)性高