草莓抗灰霉病基因定位及櫸樹種質(zhì)資源多樣性的ISSR分析.pdf

1、草莓屬于薔薇科(Rosaceae)草莓屬(Fragaria)，草莓屬共有二十三個(gè)種，其中有9個(gè)種在我國有分布，其染色體倍性有二倍體、四倍體、五倍體、六倍體、八倍體及少量的十倍體和十二倍體。目前世界各地商品化種植的以鳳梨草莓（Fragaria ananassa Duch.）為主，該品種為八倍體（2n=8x=56）。草莓生產(chǎn)周期短、見效快、收益高，且含有豐富的蛋白質(zhì)和維生素，有“水果皇后”、“水果牛奶”之美譽(yù)，深受生產(chǎn)者和消費(fèi)者的青睞。

2、r>　　草莓灰霉病是草莓促成栽培生產(chǎn)中普遍發(fā)生的重要真菌病害之一，已經(jīng)給草莓種植業(yè)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。灰霉病主要危害果實(shí)，在接近成熟的果實(shí)上最易發(fā)病，其次是危害花瓣、花萼、果梗、葉片及葉柄。成熟果實(shí)受害后產(chǎn)生淡褐色水燙狀，而后逐漸擴(kuò)大到整個(gè)果實(shí)，果肉腐爛變軟，表面密生灰色霉?fàn)钗铩Ｎ闯墒斓墓麑?shí)發(fā)病后，果實(shí)上產(chǎn)生淡褐色干枯病斑，而后果呈干腐狀。在草莓生產(chǎn)上，該病主要發(fā)生在果實(shí)轉(zhuǎn)色期到果實(shí)成熟期，后期尤為嚴(yán)重，感染灰霉病后常常會(huì)減產(chǎn)10-50

3、％，因此給莓農(nóng)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。眾所周知，目前國內(nèi)外對(duì)類似于灰霉病等真菌病害的防治還主要依賴于化學(xué)藥劑防治，這無疑會(huì)給廣大消費(fèi)者的食品安全帶來威脅，而且常常防治效果不佳。另一方面，長期大量使用農(nóng)藥和化肥會(huì)對(duì)環(huán)境造成不良影響。改變這種不利局面的最為直接、經(jīng)濟(jì)有效的措施就是培育抗灰霉病草莓新品種。定位相關(guān)的抗病基因是培育草莓抗病新品種的基礎(chǔ)，而目前對(duì)于草莓灰霉病抗性基因的遺傳特性及其相關(guān)基因分子標(biāo)記的研究仍較少。
　　本研究在前人對(duì)

4、于草莓中 SSR分子標(biāo)記的研究基礎(chǔ)上，對(duì)草莓抗灰霉病的相關(guān)的基因進(jìn)行初步定位，期望能夠找到與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，為未來的分子標(biāo)記輔助育種，篩選優(yōu)良抗病品種奠定堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)和提供幫助。
　　結(jié)果表明，在34株F1材料中抗感比為1:1，在248株F2材料中抗感比為3:1，推測(cè)供試草莓親本間灰霉病抗性受一對(duì)顯性單基因控制；同時(shí)，結(jié)合F1和F2材料進(jìn)行SSR連鎖分析，鑒定出1個(gè)與抗性基因連鎖的標(biāo)記 UFFa01H05，該標(biāo)記與抗

5、性基因間的遺傳距離為15.9 cM。
　　櫸樹(Zelkova schneideriana)，也稱大葉櫸、血櫸、雞油樹等，屬榆科(Ulmaceae)櫸樹屬(Zelkova)落葉喬木，是國家Ⅱ級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物，為我國珍貴的硬闊葉用材樹種，材質(zhì)堅(jiān)硬有彈性，少伸縮，不易翹裂，紋理美觀有光澤，結(jié)構(gòu)細(xì)致；因其葉色季相變化豐富，呈黃褐色至淺紅色，是優(yōu)良的園林觀賞樹種。
　　本研究對(duì)23個(gè)櫸樹品種在不同的生長階段測(cè)定其葉片的面積和胸徑，

6、觀察其葉色的變化并測(cè)定不同時(shí)期的葉片中花青素的含量。同時(shí)利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)23個(gè)櫸樹種質(zhì)資源進(jìn)行了遺傳親緣關(guān)系分析，多態(tài)性PCR擴(kuò)增結(jié)果表明：在128個(gè)位點(diǎn)中，其中多態(tài)位點(diǎn)有116個(gè)，多態(tài)位點(diǎn)百分率為90.6%；POPGENE32軟件計(jì)算結(jié)果表明，這23個(gè)櫸樹材料平均有效等位基因數(shù)為1.5930，Nei遺傳多樣性指數(shù)平均為0.3394，平均Shannon信息指數(shù)為0.5007；通過聚類分析將這23個(gè)櫸樹品種分為4組，該聚類結(jié)果與