AVP1基因轉(zhuǎn)化紫花苜蓿的初步研究.pdf

1、土壤鹽堿化和荒漠化是人類面臨的世界性問題，種植耐鹽抗旱植物是改良此類土地的一條有效的途徑。紫花苜蓿(Medicagosativa)是一種優(yōu)良的豆科牧草，在全世界廣泛種植。但是，紫花苜蓿耐鹽抗旱能力較弱，較難適應(yīng)高鹽干旱的生長環(huán)境。因此，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育耐鹽抗旱紫花苜蓿品種，對改良和利用我國西北地區(qū)大面積鹽荒地，從而促進(jìn)該地區(qū)畜牧業(yè)的發(fā)展以及生態(tài)環(huán)境的改善都具有重要意義。 擬南芥(Arabidopsisthaliana)V-H+

2、-PPase基因AVP1的超表達(dá)，可以增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因植株的耐鹽性和抗旱性。這是因為在鹽脅迫下，植物液泡膜質(zhì)子泵(V-H+-ATPase和V-H+-PPase)形成的H+跨膜電化學(xué)梯度驅(qū)動Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將細(xì)胞中過多的Na+區(qū)隔到液泡中，從而減輕Na+對細(xì)胞的毒害作用，并維持細(xì)胞的滲透勢。本研究的目的是將AVP1基因轉(zhuǎn)入紫花苜蓿，并優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系，初步篩選出陽性植株，為最終獲得具有較強(qiáng)耐鹽性和抗旱性的紫花苜蓿品種打下堅實(shí)的基礎(chǔ)。

3、 以我國農(nóng)藝性狀優(yōu)良的紫花苜蓿品種和田苜蓿為材料，用根癌農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)介導(dǎo)AVP1基因?qū)吞镘俎＿M(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化，探討了影響苜蓿轉(zhuǎn)化的一些主要因素，初步建立和優(yōu)化了苜蓿遺傳轉(zhuǎn)化體系。主要結(jié)果如下：(1)200mg·L-1Carb就能完全抑制農(nóng)桿菌GV3101菌株的生長；而且，Carb對和田苜蓿胚性愈傷組織的誘導(dǎo)無明顯影響。(2)Kan對下胚軸誘導(dǎo)愈傷組織的最佳選擇壓為75mg·L-1，對誘導(dǎo)體胚的