線粒體DNA中D-Loop突變?cè)诜切〖?xì)胞肺癌中的意義.pdf

1、目的：線粒體DNA（Mitochondrial DNA，mtDNA）在結(jié)構(gòu)上缺乏組蛋白保護(hù)及相應(yīng)的基因修復(fù)系統(tǒng)，其突變率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于核DNA且突變集中于D-Loop區(qū)，現(xiàn)已在多種常見的腫瘤中都發(fā)現(xiàn)了mtDNA突變。近幾十年來?yè)?jù)世界衛(wèi)生組織定期公布的資料顯示，全世界肺癌的發(fā)病率和死亡率明顯增高，在我國(guó)肺癌也已成為癌癥中的主要?dú)⑹?，因此探討非小?xì)胞肺癌mtDNA中D-Loop突變有可能揭示肺癌的發(fā)生進(jìn)而指導(dǎo)臨床治療，從而為肺癌的診治帶來飛躍。<

2、br>　　方法：收集20例非小細(xì)胞肺癌患者的癌及癌旁組織，采用堿裂解法提取其細(xì)胞的線粒體DNA,用聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴(kuò)增D-Loop區(qū)并進(jìn)行測(cè)序，然后以人類基因組中mtDNA的D-Loop區(qū)序列為對(duì)照，對(duì)20例非小細(xì)胞肺癌患者的癌及癌旁組織細(xì)胞的mtDNA的D-Loop區(qū)序列結(jié)果進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：⑴在20例非小細(xì)胞肺癌患者的癌組織及癌旁組織mtDNA中，我們以基因庫(kù)序列為

3、標(biāo)準(zhǔn)，與基因庫(kù)序列不同的作為基因變異，20例標(biāo)本都發(fā)生突變，總突變數(shù)265個(gè)，其中癌組織特異性突變69個(gè)，癌旁組織特異性突變96個(gè)，共同突變50個(gè)。⑵區(qū)域分類中HVRI區(qū)有77個(gè)突變，HVRII區(qū)有151個(gè)突變，HVRIII區(qū)有17個(gè)突變，周邊區(qū)有20個(gè)突變，突變主要集中于 D-Loop的HVRII區(qū)（151/265=56.98％）。⑶同時(shí)出現(xiàn)于4位或者4位以上患者的高變位點(diǎn)有10個(gè)，突變率最高的位點(diǎn)是73和263位點(diǎn)，突變率為30%（