EGFR基因突變與EGFR蛋白表達(dá)在非小細(xì)胞肺癌中的臨床意義.pdf

1、肺癌(lung cancer)是最常見的惡性腫瘤之一，是人類因癌癥而死亡的首要原因，被認(rèn)為是當(dāng)今世界上對人類健康危害最大的惡性腫瘤。其中以非小細(xì)胞肺癌(non—small cell lung cancer, NSCLC)最多見，約占肺癌發(fā)病總數(shù)的80％，手術(shù)切除是早期NSCLC最有效的治療方法，但50％—60％的Ⅰ—ⅢA期NSCLC患者盡管進(jìn)行了完全的手術(shù)切除，仍會復(fù)發(fā)死亡。患者復(fù)發(fā)后的中位生存期大約是11.5月。 近年來，以表

2、皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)為靶點(diǎn)的分子靶向治療在NSCLC的治療中發(fā)揮著越來越重要的作用。EGFR屬于受體酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases，RTKs)家族，調(diào)控細(xì)胞的生長、分化、血管生成及凋亡抑制，其信號通路與惡性腫瘤的生長、侵襲及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。 以吉非替尼(Gefitinib，商品名Iressa)和埃羅替寧(Erlotinib，商品

3、名Tarceva)為代表的酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors，TKIs)針對性抑制結(jié)合EGFR，從而抑制酪氨酸激酶(tyrosine kinase，TK)活性，使腫瘤縮小。在晚期NSCLC治療中，Gefitinib的有效率約為20％，并有大量的研究顯示Gefitinib對存在EGFR基因第19和21外顯子突變的東方亞裔NSCLC患者的治療效果非常好，且EGFR基因突變在腺癌、女性和非吸煙患者居多。

4、 因此，進(jìn)一步研究EGFR基因第19和21外顯子突變的篩選辦法、分子生物學(xué)特征及其與NSCLC臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系，將有利于NSCLC的生物靶向治療。 目的： 探討NSCLC患者肺癌組織中EGFR基因突變、EGFR基因第19和21外顯子突變以及EGFR蛋白表達(dá)的情況，及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系；分析EGFR基因突變、EGFR基因第19和21外顯子突變與EGFR蛋白表達(dá)間的關(guān)系；建立一種快速、可靠的檢測EGFR

5、基因突變的新方法。 方法： 收集中山大學(xué)附屬第二醫(yī)院1998年9月至2008年8月間手術(shù)切除并經(jīng)病理確診的原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌病例，連續(xù)抽取其中282例患者的石蠟包埋癌組織和收集臨床病理資料、隨訪資料。組織學(xué)分類采用2004年《肺、胸膜、胸腺及心臟腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)》中WHO分類標(biāo)準(zhǔn)。對所有的病例分別用PCR—熒光探針法(PCR—fluorescence probing assay)和直接測序法(direct sequen

6、cing)檢測肺癌組織中EGFR基因第19和21外顯子突變；用免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry, IHC)鏈霉菌抗生物素蛋白－過氧化物酶連結(jié)法(streptavidin—peroxidase，S—P)檢測肺癌組織中的EGFR蛋白表達(dá)；對病例資料和實(shí)驗(yàn)結(jié)果、生存分析應(yīng)用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1.本研究NSCLC患者的EGFR基因突變率是42.

7、6％，其第19外顯子突變率為21.6％，第21外顯子突變率為23.4％。EGFR基因第19外顯子突變有11種不同的突變形式，其中delE746-S752insV+K754R+K757T、K739E+K757R+L760P、L760P三種類型為新發(fā)現(xiàn)的突變類型；第21外顯子突變有9種不同的突變形式，其中G873R、L858R+E865K、G874D、D855N四種類型為新發(fā)現(xiàn)的突變類型。 2.EGFR基因及其第19外顯子突變在腺癌

8、、細(xì)支氣管肺泡癌、腺鱗癌、女性及非吸煙患者中多見。 3.EGFR基因及其第19外顯子突變與腫瘤的大小和分化程度均有密切關(guān)系；EGFR基因突變與患者年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有密切關(guān)系，但EGFR基因第19外顯子突變與患者年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)；EGFR基因及其第19外顯子突變與臨床TNM分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移均無關(guān)。EGFR基因及其第19外顯子突變型組患者的預(yù)后均比野生型組好。 4.EGFR基因第21外顯子突變在腺癌、細(xì)支氣管肺泡癌、腺

9、鱗癌中多見，與患者的年齡、腫瘤的大小和分化程度均有密切關(guān)系；而與性別、吸煙、臨床TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和預(yù)后均無關(guān)。 5.NSCLC組織中的EGFR蛋白陽性表達(dá)率是45.4％。EGFR蛋白表達(dá)與患者的性別、年齡、吸煙、腫瘤的大小、組織學(xué)類型、分化程度、臨床TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和預(yù)后均無關(guān)。 6.EGFR基因及其第19和21外顯子突變均與EGFR蛋白表達(dá)無關(guān)。 7.PCR—熒光探針法是一種檢測