瑞士乳桿菌發(fā)酵劑制備及其發(fā)酵產(chǎn)物生物活性的評價(jià).pdf

1、本文對瑞士乳桿菌發(fā)酵劑制備的關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行了研究，篩選了增殖培養(yǎng)基和高效凍干保護(hù)劑，優(yōu)化了乳酸菌增殖培養(yǎng)、細(xì)胞濃縮分離等工藝條件，在此基礎(chǔ)上，評價(jià)了其發(fā)酵產(chǎn)物的降血壓功能和免疫功能，旨在初探瑞士乳桿菌的生物活性作用機(jī)理及其功能成分和量效關(guān)系，為工業(yè)化開發(fā)含有瑞士乳桿菌的功能性乳制品提供必要理論和技術(shù)基礎(chǔ)。
　　 實(shí)驗(yàn)確定了瑞士乳桿菌的最佳增殖培養(yǎng)基組成為：酶水解11％脫脂乳中加0.5％乳糖，0.5％胰蛋白胨，0.3％酵母膏，體積分

2、數(shù)為1％KH2PO4-NaOH，40℃培養(yǎng)14 h，此培養(yǎng)基中活菌數(shù)為5.87×109cfu/mL，分別比在11％脫脂乳培養(yǎng)基和酶解脫脂乳培養(yǎng)基中提高100倍和15.4倍。將瑞士乳桿菌發(fā)酵液離心，選擇最佳離心條件：轉(zhuǎn)速為4000r/min，離心時(shí)間為20 min，添加復(fù)合保護(hù)劑10％海藻糖、11％脫脂乳、4％谷氨酸鈉制成菌懸液，經(jīng)過真空冷凍干燥，凍干存活率高達(dá)83％。
　　 在制備了濃縮型發(fā)酵劑的基礎(chǔ)上，利用8周齡先天性高血壓大

3、鼠(SHR)觀察瑞士乳桿菌發(fā)酵乳及乳清對尾部動(dòng)脈血壓和心率，血脂可能產(chǎn)生的影響。發(fā)現(xiàn)瑞士乳桿菌發(fā)酵乳及乳清可以改善血清中總膽固醇和甘油三酯的含量；灌胃6周發(fā)酵乳的SHR大鼠血壓在第四周與對照組比有明顯下降(P＜0.05)，收縮壓最多下降了11.4±1.7 mmHg，且隨灌胃時(shí)間的延長，與對照組間的差值緩緩增加，這些結(jié)果表明，長期服用瑞士乳桿菌發(fā)酵乳不僅可以明顯緩解血壓的升高而且作用較穩(wěn)定，有助于阻止SHR高血壓形成前過度期的發(fā)展，對動(dòng)脈

4、硬化和高血脂癥也可能有作用。這一結(jié)果還需臨床觀察進(jìn)一步驗(yàn)證。
　　 本文還對瑞士乳桿菌及其發(fā)酵產(chǎn)物的增強(qiáng)免疫功力能進(jìn)行了研究，給小鼠灌服瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)活菌液，細(xì)胞裂解液，發(fā)酵產(chǎn)物及普通酸乳和乳清后，對其免疫功能指標(biāo)進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)瑞士乳桿菌活菌液能夠促進(jìn)小鼠的胸腺發(fā)育，顯著提高巨噬細(xì)胞的吞噬功能，顯著的激活B淋巴細(xì)胞活性，最佳作用活菌數(shù)為2×109cfu/mL，最佳作用劑量為20 m

5、L/kg b.w；瑞士乳桿菌發(fā)酵乳清可以顯著提高巨噬細(xì)胞的吞噬功能，顯著增加血清中IgG的含量，最佳作用劑量為25 mL/kg b.w。這些結(jié)果表明，瑞士乳桿菌活菌液(活菌數(shù)大于2×108cfu/mL)對特異性細(xì)胞免疫功能和非特異性免疫功能有明顯的促進(jìn)作用，其發(fā)酵乳清高劑量組對特異性細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能有明顯的促進(jìn)作用。二者的免疫活性均強(qiáng)于其細(xì)胞裂解液及普通酸乳。瑞士乳桿菌的免疫活性成分既包括菌體所含細(xì)胞壁成分，也包括其代謝產(chǎn)物。