Kefir粒菌相分析與植物乳桿菌發(fā)酵劑的制備.pdf

1、本課題通過PCR-DGGE技術(shù)，對Kefir粒的菌相構(gòu)成進(jìn)行研究，并對Kefir發(fā)酵過程中微生物變化進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)控。利用分子生物學(xué)技術(shù)與實(shí)驗(yàn)室前期對Kefir傳統(tǒng)菌種分離、鑒定的結(jié)果，分析植物乳桿菌MA2在發(fā)酵過程中的動(dòng)態(tài)變化。對其體外降膽固醇功能進(jìn)行了研究，并對制備發(fā)酵劑的噴霧干燥的條件及噴霧干燥保護(hù)劑進(jìn)行優(yōu)化，通過噴霧干燥將其制備成益生菌發(fā)酵劑。所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　通過PCR-DGGE分析，發(fā)現(xiàn)Kefir粒中有9種細(xì)菌和4種

2、真菌處于優(yōu)勢地位。Kefir發(fā)酵過程中，細(xì)菌菌相變化明顯，12h到16h時(shí)Kefir中細(xì)菌的種類和數(shù)量最多，細(xì)菌種類可達(dá)9種，其中3種細(xì)菌伴隨著整個(gè)發(fā)酵過程，發(fā)酵過程中細(xì)菌種群結(jié)構(gòu)的相似性為70％-83％;真菌在發(fā)酵過程中菌相比較穩(wěn)定，有3種真菌在發(fā)酵過程中始終處于優(yōu)勢菌群，發(fā)酵過程中真菌種群結(jié)構(gòu)的相似性為80％-87％。
　　對MA2的DGGE電泳結(jié)果顯示，該菌在Kefir發(fā)酵過程中處于優(yōu)勢地位。對MA2進(jìn)行了體外降膽固醇實(shí)驗(yàn)，

3、其膽固醇移除率與菌體密度呈正相關(guān)，在膽固醇濃度為30mg/100mL的MRS培養(yǎng)基中，其膽固醇移除率為46.8％。
　　通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化噴霧干燥保護(hù)劑，確定保護(hù)劑配方為:谷氨酸鈉2％，海藻糖5％，乳糖5％，脫脂奶10％。通過響應(yīng)面分析對噴霧干燥條件進(jìn)行優(yōu)化，確定了噴干最適條件:進(jìn)風(fēng)溫度152℃，進(jìn)料流速62mL/h，保護(hù)劑菌泥比例3.4∶1。按上述實(shí)驗(yàn)條件得到噴霧干燥得到干菌粉的活菌數(shù)為2.11×109cfu/g，凝乳時(shí)間12h，