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1、目的:本課題通過單獨(dú)或聯(lián)合使用不同濃度的1,25-二羥維生素D3[1,25-di-hydroxy vitamin D3,1,25(OH)2D3]和全反式維甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)對人卵巢癌細(xì)胞株HO8910進(jìn)行誘導(dǎo),研究其對腫瘤細(xì)胞生長、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響,探討其作用的分子機(jī)制。 方法:選用人卵巢癌細(xì)胞株HO8910進(jìn)行體外培養(yǎng),用不同濃度的1,25(OH)2D3和ATRA單獨(dú)或聯(lián)合
2、用藥處理后,采用MTT比色法測定細(xì)胞生長抑制率,采用流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM)進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的變化分析,采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測維生素D受體(vitamin D receptor,VDR)及維甲酸α受體(retinoic acid receptorα,RARα)mRNA的表達(dá)。 結(jié)果:
3、(1)MTT結(jié)果顯示,單獨(dú)或聯(lián)合使用不同濃度的1,25(OH)2D3和ATRA后的HO8910細(xì)胞生長均受到抑制,與對照組細(xì)胞相比其生長抑制率有顯著差異(P<0.05),其中聯(lián)合用藥組抑制率明顯高于單獨(dú)用藥組。(2)FCM結(jié)果顯示,1,25(OH)2D3和ATRA作用于HO8910細(xì)胞后均能引起細(xì)胞周期時相的改變(P<0.05),即G1期阻滯,同時G2、S期細(xì)胞比例下降;1,25(OH)2D3和ATRA均能誘導(dǎo)HO8910細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞凋
4、亡(P<0.05),并以聯(lián)合用藥組最為顯著。(3)RT-PCR結(jié)果顯示,單獨(dú)或聯(lián)合使用1,25(OH)2D3和ATRA后,H08910細(xì)胞的VDR及RARα mRNA的表達(dá)上調(diào)(P<0.05),并以聯(lián)合用藥組最為顯著。 結(jié)論:1,25(OH)2D3和ATRA均能抑制卵巢癌細(xì)胞H08910生長,且有濃度和時間依賴性;能誘導(dǎo)細(xì)胞周期發(fā)生G1期阻滯,同時產(chǎn)生細(xì)胞凋亡作用;通過上調(diào)VDR及RARα mRNA的表達(dá),從而抑制HO8910細(xì)
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