WWOX基因轉(zhuǎn)染對(duì)人卵巢癌細(xì)胞系HO8910生長(zhǎng)作用影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的: 研究抑癌基因WWOX對(duì)人卵巢癌細(xì)胞系HO8910生長(zhǎng)作用的影響，尋求卵巢癌基因治療的新途徑。 方法: 將攜有WWOX基因的真核表達(dá)載體體外轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞系HO8910細(xì)胞(重組質(zhì)粒組)，篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞并擴(kuò)增培養(yǎng)。用蛋白印跡法檢測(cè)WWOX蛋白的表達(dá)情況，并以轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒(空質(zhì)粒組)及未經(jīng)轉(zhuǎn)染的HO8910細(xì)胞(空白對(duì)照組)作為對(duì)照。體外實(shí)驗(yàn)：分別用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法、體外侵襲實(shí)驗(yàn)、瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞儀等分析W

2、WOX基因?qū)O8910細(xì)胞生物學(xué)活性的影響。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：將轉(zhuǎn)染細(xì)胞接種于BALB/c裸鼠腹腔，并觀察裸鼠生存時(shí)間和腫瘤生長(zhǎng)情況。 結(jié)果: (1) 重組質(zhì)粒組細(xì)胞中WWOX蛋白能穩(wěn)定表達(dá)，空質(zhì)粒組及空白對(duì)照組細(xì)胞未檢測(cè)到WWOX蛋白的表達(dá)。 (2) 重組質(zhì)粒組各時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞增值能力較空質(zhì)粒組及空白對(duì)照組明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (3) 重組質(zhì)粒組細(xì)胞的瓊脂克隆形成率(19.8％)明顯低

3、于空質(zhì)粒組(54.5％)及空白對(duì)照組(56.0％)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (4) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示，重組質(zhì)粒組中72.08％的細(xì)胞阻滯于G0/G1期，分別與空質(zhì)粒組(41.02％)及空白對(duì)照組(39.31％)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (5) 體外侵襲實(shí)驗(yàn)顯示，重組質(zhì)粒組穿膜細(xì)胞數(shù)為(89.7±3.1)個(gè)，分別與空質(zhì)粒組[(91.2±1.3)個(gè)]及空白對(duì)照組[(91.4±1.3)個(gè)]比較，