大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中BDNF和TrkB的表達(dá)意義及髓鞘改變的研究.pdf

1、目的:1.觀察蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷(≤3d)模型中大鼠神經(jīng)功能改變和水腫情況。
　　2.觀察各組大鼠神經(jīng)元細(xì)胞凋亡水平和髓鞘的變化,探討二者在SAH后EBI中的病理生理改變和作用。
　　3.觀察各組大鼠BDNF和TrkB的表達(dá)規(guī)律,以了解二者在神經(jīng)功能保護(hù)中的作用及與早期腦損傷的關(guān)系。
　　方法:1.應(yīng)用頸內(nèi)動(dòng)脈線栓穿刺法建立SD大鼠SAH模型,將64只(剔除死亡者并及時(shí)補(bǔ)充)清潔級(jí)SD雄性大鼠(300g±20g

2、)隨機(jī)分為2組,每組各取24h、72h兩個(gè)亞組,每亞組16只:①Sham組:(即J24h組和J72h組);②SAH組:(即M24h組和M72h組)。所有大鼠在各時(shí)間點(diǎn)灌注-固定后或者直接麻醉處死留取標(biāo)本,每亞組6只用于免疫組化和TUNEL實(shí)驗(yàn),8只用于ELISA檢測(cè),2只用TEM觀察腦組織超微結(jié)構(gòu)。
　　2、分組情況同第一部分,應(yīng)用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)和電鏡技術(shù),觀察大鼠腦皮層凋亡細(xì)胞及髓鞘等的變化。
　　3、分組情況同第

3、一部分,應(yīng)用免疫組化和ELISA技術(shù),觀察大鼠大腦皮質(zhì)BDNF和TrkB的動(dòng)態(tài)表達(dá)。
　　結(jié)果:1.SD大鼠SAH后3天內(nèi)死亡率49.20％。模型組大鼠可見(jiàn)明顯的神經(jīng)功能缺損,腦水腫嚴(yán)重。
　　2.TUNEL法顯示Sham組24h和72h可見(jiàn)少量凋亡細(xì)胞,M24h組凋亡細(xì)胞增加,M72h組凋亡細(xì)胞顯著增加。
　　3.電鏡結(jié)果示SAH組部分神經(jīng)元細(xì)胞溶解壞死,軸突腫脹,髓鞘丟失,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　4.免疫組化和E

4、LISA結(jié)果示Sham組少量表達(dá)BDNF和TrkB(P>0.05),M24h組二者表達(dá)量明顯增加,至72h時(shí)二者的表達(dá)明顯增加(P<0.05)。
　　結(jié)論:1.采用SD大鼠經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈穿刺建立蛛網(wǎng)膜下腔出血模型可靠,該模型基本適用于SAH后EBI的發(fā)病機(jī)制及治療的研究。
　　2.大鼠SAH后腦組織受損傷、細(xì)胞凋亡、脫髓鞘等,在SAH后EBI中的病理生理改變發(fā)揮著重要的作用。
　　3.大鼠SAH后BDNF和TrkB的表達(dá)明