產(chǎn)前細(xì)菌人工染色體標(biāo)記——磁珠分離法的臨床性能研究.pdf

1、目的：
　　 產(chǎn)前BoB檢測是一種新的用于快速產(chǎn)前診斷的方法，通過標(biāo)記目標(biāo)區(qū)域位點，使用已設(shè)計好的探針檢測提取自人體標(biāo)本（羊水、絨毛、臍帶血）中的DNA樣本來診斷染色體非整倍體異常（13、18、21、X和Y染色體）和10種微缺失綜合征。本研究通過與傳統(tǒng)的G顯帶法核型分析結(jié)果比較來評估BoBs方法的準(zhǔn)確性、敏感性、特異性及其快速產(chǎn)前診斷中的預(yù)測價值來探討這種新的檢測方法在臨床實踐中應(yīng)用的可行性。
　　 方法：
　　

2、 本次試驗分為兩部分，兩部分試驗均采用自身配對設(shè)計方案：
　　 第一部分（回顧性研究）：從北京協(xié)和醫(yī)院選取細(xì)胞遺傳室選取20例已知染色體核型結(jié)果的羊水標(biāo)本（包括染色體核型異常和正常標(biāo)本）和1例來自于DNA細(xì)胞系的陽性標(biāo)本（DiGeorge1綜合征）進行BoBs方法驗證試驗，對比BoBs試驗結(jié)果與已知的核型分析結(jié)果，驗證BoBs方法的準(zhǔn)確性。
　　 第二部分（前瞻性研究）：對2011年10月-2012年3月間于北京協(xié)和醫(yī)院

3、接受羊膜腔穿刺行產(chǎn)前診斷的孕婦同時進行BoBs方法來檢測非整倍體異常和微缺失綜合征，并通過BoBsoft軟件分析檢測結(jié)果。比較BoBs方法與傳統(tǒng)的G顯帶法核型分析方法的結(jié)果，來評估這種新方法敏感性、特異性及準(zhǔn)確性。
　　 結(jié)果：
　　 1．在本研究的回顧性試驗部分，經(jīng)檢測提取自羊水的DNA樣本有3例濃度<4ng/μ1，因此共有18例標(biāo)本通過BoBs方法進行檢測，共檢測出1例18-_體，2例21-三體，1例DiGeorge

4、1綜合征，與已知的核型分析結(jié)果一致，證明了該方法的準(zhǔn)確性、特異性及敏感性。
　　 2．在前瞻性試驗部分：①運用BoBs方法共檢測來源于新鮮羊水的DNA標(biāo)本390例，檢驗結(jié)果經(jīng)過質(zhì)量控制評估有377例樣本檢測合格，此方法的檢測成功率為96.7％(377/390)。共檢測出18-三體1例、21-三體7例、15號染色體異常1例；②通過與檢測樣本的傳統(tǒng)核型分析方法對比，BoBs方法共漏診2例染色體異常（包括1例18-三體、1例嵌合體45

5、X[3]/46XX[17]。BoBs方法檢測出的15號染色體異常樣本的G顯帶法核型分析結(jié)果診斷21-三體，將此標(biāo)本用ArrayCGH方法驗證后證實BoBs方法檢測正確（為15染色體長臂片段的致畸性重復(fù)）；③經(jīng)統(tǒng)計分析得出，與傳統(tǒng)的G顯帶核型分析方法相比，BoBs方法的陽性率、靈敏度、假陽性率、特異性、準(zhǔn)確性分別為2.4％、81.8％、0、100％、99.5％。
　　 結(jié)論：
　　 1．BoBs方法與傳統(tǒng)G顯帶核型分析方法

6、有良好的相關(guān)性。
　　 2．BoBs方法是一種用于檢測染色體非整倍體異常和10種微缺失綜合征的快速、可靠、易操作的方法。
　　 3．BoBs方法具有高敏感性、特異性及準(zhǔn)確性，可取代FISH、QF-PCR等快速產(chǎn)前診斷方法。
　　 4．BoBs方法結(jié)合傳統(tǒng)的G顯帶核型分析方法可提高產(chǎn)前診斷的準(zhǔn)確性、多樣性。
　　 5．目前該方法尚不能用于嵌合體異常、本產(chǎn)品沒有覆蓋的染色體區(qū)域的擴增和缺失、點突變、平衡性重排