小兒肺炎病證規(guī)律及肺炎合劑對(duì)RSV感染A549細(xì)胞后趨化因子影響的研究.pdf

1、目的: 臨床部分：對(duì)小兒肺炎進(jìn)行病證規(guī)律研究，通過探討小兒肺炎的中醫(yī)證型分布及特點(diǎn)、不同病原體小兒肺炎中醫(yī)證候特點(diǎn)、疾病指標(biāo)與辨證指標(biāo)相關(guān)性，以及證型演變規(guī)律，為小兒肺炎的標(biāo)準(zhǔn)化診療提供依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)部分：小兒肺炎合劑對(duì)RSV感染氣道上皮細(xì)胞(A549)引發(fā)的趨化因子RANTES、MCP-1 釋放的影響，探討小兒肺炎合劑治療呼吸道合胞病毒下呼吸道感染 (RSV-LRTI)的分子學(xué)機(jī)理。 方法: 臨床部分：采

2、用前瞻性隊(duì)列研究。在廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院對(duì)1月至14歲的住院肺炎患兒進(jìn)行證候?qū)W觀察，并檢測(cè)常見病原體 (MP、RSV、ADV、IV)血清IgM抗體，填寫“小兒肺炎病證規(guī)律研究報(bào)告表”，對(duì)所收集的資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 實(shí)驗(yàn)部分：用RSV感染Hep-2 后，分別加入小兒肺炎合劑含藥維持液及病毒唑注射液，觀察小兒肺炎合劑抑制RSV病毒的作用；用RSV感染A549細(xì)胞后，分別加入小兒肺炎合劑含藥維持液及病毒唑注射液，用ELISA

3、檢測(cè)各組細(xì)胞趨化因子 RANTES、MCP-1 含量。 結(jié)果: 臨床部分： 1．小兒肺炎證型分布情況：最常見的證型為痰熱閉肺證占 69.5％，其次為風(fēng)熱閉肺證占20.5％，肺脾氣虛證19例(10.0％)，未發(fā)現(xiàn)風(fēng)寒閉肺、毒熱閉肺、陰虛邪戀證。其中部分痰熱閉肺、風(fēng)熱閉肺證中后期病情出現(xiàn)演變，轉(zhuǎn)為肺脾氣虛證者44例(25.7％)，陰虛邪戀證 2 例(1-2％)。 2．各證型的臨床特點(diǎn)： 風(fēng)熱閉肺證與痰

4、熱閉肺證在痰壅程度、鼻部情況比較有顯著差異，風(fēng)熱閉肺相對(duì)痰壅的程度相對(duì)較輕，鼻塞流涕是外感表證的特點(diǎn)之一；而在熱、喘、咳方面的比較無差異。 肺脾氣虛證與其他兩證比較在熱、咳、面色、雙下眼胞方面的情況比較有顯著差異，肺脾氣虛證幾乎無發(fā)熱，咳聲以咳聲無力為特點(diǎn)，面色多無華、萎黃或淡白，雙下眼胞微浮隱青；在痰、喘方面的比較與其他兩證無差異。 各證型在舌質(zhì)、舌苔、脈象(指紋)情況比較均有非常顯著的差異。 各證型在西醫(yī)主要

5、診斷指標(biāo)如肺部體征、影像學(xué)及病原學(xué)診斷之間比較無差異。 3．三因制宜：中醫(yī)證型的分布雖未因人、因地不同，但卻因時(shí)不同。疾病過程中證型的轉(zhuǎn)化因人而異，與體質(zhì)因素密切相關(guān)。 4．不同病原小兒肺炎臨床特點(diǎn)： 不同病原肺炎臨床表現(xiàn)的中醫(yī)證候并不一樣，支原體肺炎以發(fā)熱時(shí)間較長(zhǎng)，而呼吸道合胞病毒肺炎以喘促為主要表現(xiàn)。 不同病原小兒肺炎在肺部體征上具有不同特點(diǎn)：MP肺炎及IV 肺炎以雙肺僅少量羅音或無羅音為主要表現(xiàn)，R

6、SV肺炎以中等量羅音甚至是雙肺滿布羅音為特點(diǎn)，在出現(xiàn)呼氣相喘鳴音方面的比較，RSV肺炎更容易出現(xiàn)呼氣相的喘鳴。 5．證型的演變：肺炎的早期和中期，均以風(fēng)熱閉肺、痰熱閉肺證為主。治療后發(fā)生證型轉(zhuǎn)化的概率為 24.2％(46/190)，其中44例向肺脾氣虛轉(zhuǎn)化，2例相陰虛內(nèi)熱證轉(zhuǎn)化，發(fā)生證型轉(zhuǎn)化的時(shí)限平均為治療后6.93天。 預(yù)測(cè)證型轉(zhuǎn)化的 logistic 回歸方程：logit(P)=-3.6939+0.9116 面色+1

7、.7141 眼胞微浮隱青+1.5317 自汗。 6．對(duì)小兒肺炎四大主癥與西醫(yī)主要的診斷指標(biāo)進(jìn)行典型相關(guān)分析，并寫出第一對(duì)典型相關(guān)變量為V1=0.9898 (三凹征)+0.0246(肺部體征)+0.0012(胸片改變)W1=0.9931 (氣促程度)-0.0042(發(fā)熱程度)-0.0022(咳程度)+0.0236(痰壅程度)第二對(duì)典型相關(guān)變量為V2= -0.4615(三凹征)+1.0456(肺部體征)-0.2368(胸片改變)W2

8、= -0.1171(氣促程度)-0.4192(發(fā)熱程度)+0.7787(痰壅程度)+0.4091(咳程度)實(shí)驗(yàn)部分：體外試驗(yàn)研究結(jié)果提示小兒肺炎合劑有直接抗RSV的作用，且呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系：A549細(xì)胞受到RSV攻擊后，RANTES、MCP-1表達(dá)或釋放顯著增多，小兒肺炎合劑干預(yù)后其RANTES、MCP-1 明顯降低，但仍顯著高于正常細(xì)胞組。 結(jié)論： 臨床部分： 1．小兒肺炎的優(yōu)勢(shì)證為痰熱閉肺證，這對(duì)提高辨證水

9、平有一定的指導(dǎo)意義，確認(rèn)中醫(yī)藥干預(yù)優(yōu)勢(shì)證十分重要。 2．各證型臨床特點(diǎn)主要表現(xiàn)在中醫(yī)傳統(tǒng)的四診特點(diǎn)上不同。與西醫(yī)主要診斷指標(biāo)如肺部體征、影像學(xué)及病原學(xué)診斷之間沒有明確關(guān)系。提示中醫(yī)證型的確立仍然要依靠傳統(tǒng)的四診合參，不能將西醫(yī)的辨病代替中醫(yī)的辨證。 痰濁閉肺是本研究所得出的一個(gè)新證型，與教材上的“肺脾氣虛證”的鑒別點(diǎn)是：兩者雖都有肺脾氣虛表現(xiàn)，但前者表現(xiàn)出明顯的氣促痰壅。 3．中醫(yī)證型的轉(zhuǎn)化卻因人而異，與體質(zhì)因素

10、密切相關(guān)。提示整體觀念對(duì)中醫(yī)辨證的重要指導(dǎo)作用。小兒肺炎的辨證應(yīng)該辨病、辨證、辨體質(zhì)三辨結(jié)合的模式，它充分體現(xiàn)了中醫(yī)臨床思維的多元性和復(fù)雜性特征。 4．病原微生物檢測(cè)結(jié)果可能反映了某些證候上特點(diǎn)，但某方面證候的差異并不足以決定它的“證”。 5．證型的演變：肺炎的早期和中期，均以風(fēng)熱閉肺痰熱閉肺證為主。治療的第1周末 (病程第11～16天)是證型發(fā)生轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵時(shí)期。發(fā)生證型轉(zhuǎn)化的概率為24.2％ (46/190)，我院觀察

11、的病例證型轉(zhuǎn)化具有明顯的不均衡性，即絕大部分(44例)向肺脾氣虛轉(zhuǎn)化，且與患兒素體不足密切相關(guān)，而并非治療不當(dāng)、病情遷延所致。面色無華萎黃或淡白、眼胞微浮隱青、自汗三個(gè)癥狀是預(yù)測(cè)小兒肺炎證型向肺脾氣虛證轉(zhuǎn)化的重要指征，對(duì)指導(dǎo)臨床辨證與治療有重要意義。 6．小兒肺炎疾病判斷指標(biāo)與證的主要判斷指標(biāo)之間存在一定的相關(guān)性：氣促程度與三凹征明顯正相關(guān)；痰壅及咳嗽程度受肺部體征影響較大，肺部體征越明顯，其痰壅及咳嗽的程度越嚴(yán)重；吸氣三凹征越