慢性低氧高二氧化碳大鼠大腦損傷及紅花的干預(yù)作用.pdf

1、目的： 采用慢性低氧(O2)高二氧化碳(CO2)大鼠模型，觀察大鼠大腦組織病理改變，熱休克蛋白(HSP)70、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醇(MDA)及黃嘌呤氧化酶(XOD)的表達(dá)，并用紅花注射液進(jìn)行干預(yù)，研究紅花注射液對(duì)慢性低02高CO2大鼠大腦的保護(hù)作用。 方法： 將二級(jí)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只，體重(180-220)g，隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組(對(duì)照組)、慢性低O2高CO2組(模

2、型組)、慢性低O2高CO2+紅花治療組(干預(yù)組)，每組10只。慢性低O2高CO2組置于常壓低氧高二氧化碳艙內(nèi)，充入N2使O2濃度維持在9.0％-11.0％，CO2濃度維持在5.0％-6.5％。艙內(nèi)置無水CaCl2吸收水蒸氣，每天8小時(shí)，每周6天，連續(xù)4周，其余時(shí)間與正常對(duì)照組置同一室內(nèi)：慢性低O2高CO2+紅花注射液用藥組，每次低O2高CO2前予紅花注射液(2ml·kg-1·d-1)腹腔注射，其它條件同模型組。4周后大鼠用戊巴比妥鈉(3

3、5mg/kg)腹腔麻醉，斷頭處死，光鏡和電鏡下觀察各組大腦組織的病理改變；免疫組織化學(xué)法定性觀察各組大腦海馬組織HSP70的表達(dá)情況，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法定量測(cè)定大腦組織HSP70mRNA相對(duì)含量的變化;化學(xué)比色法測(cè)定各組大腦組織SOD、MDA、XOD的水平。 結(jié)果： (1)光鏡下，對(duì)照組海馬結(jié)構(gòu)正常，椎體細(xì)胞排列整齊，形態(tài)正常，細(xì)胞著色均勻。模型組椎體細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞間隙增寬，部分細(xì)胞呈現(xiàn)胞漿皺縮、胞

4、核固縮、溶解等壞死特征。干預(yù)組神經(jīng)細(xì)胞排列略紊亂，仍可見細(xì)胞皺縮和胞核固縮濃染現(xiàn)象，但程度較模型組明顯減輕。 電鏡下，對(duì)照組神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞器豐富，結(jié)構(gòu)完整。模型組神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞胞漿水腫明顯，核染色質(zhì)密度降低，核膜破裂，細(xì)胞器減少，線粒體腫脹，嵴斷裂，空泡明顯，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡狀擴(kuò)張，表面核耱體脫落。干預(yù)組神經(jīng)元細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)較清晰，核膜完整，核染色質(zhì)密度降低，胞漿內(nèi)線粒體稍腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器較豐

5、富。 (2)各組大鼠大腦海馬組織HSP70表達(dá)的比較(免疫組織化學(xué))：細(xì)胞漿及細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕褐色產(chǎn)物為陽性標(biāo)記，顏色越深，范圍越廣表示HSP70的表達(dá)越多。對(duì)照組大鼠海馬組織內(nèi)HSP70陽性細(xì)胞極少。模型組大鼠海馬可見棕黃色的HSP70陽性細(xì)胞，分布密集且胞漿著色較深，CA1區(qū)椎體細(xì)胞和齒狀回顆粒細(xì)胞的細(xì)胞漿內(nèi)陽性表達(dá)明顯多于對(duì)照組。干預(yù)組細(xì)胞漿內(nèi)陽性表達(dá)較模型組又明顯減少。 (3)各組大鼠大腦組織HSP70mRNA相對(duì)

6、含量之間的比較：HSP70mRNA相對(duì)含量在模型組顯著高于對(duì)照組(P＜0.01，n=8)，干預(yù)組較模型組明顯降低(P＜0.01)。 (4)各組大鼠大腦組織SOD、MDA及XOD含量的比較：SOD含量模型組明顯低于對(duì)照組(P＜0.00，n=8)，干預(yù)組較模型組顯著升高(P＜0.01)：MDA及XOD含量對(duì)照組明顯低于模型組(P＜0.01)，而干預(yù)組較模型組明顯降低(P＜0.01)。干預(yù)組和對(duì)照組之間無顯著差異(P＞0.1)。