CTGF在慢性低氧高二氧化碳性肺動脈高壓形成中的作用及葛根素的干預效應.pdf

1、目的： 觀察結締組織生長因子(CTGF)在慢性低氧高二氧化碳性肺動脈高壓大鼠模型中的變化，并探討其在肺動脈高壓發(fā)生、發(fā)展中的作用及葛根素的干預效應。 方法： 將SPF級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只(體重180～210g)，隨機分成4組(n=10)，即正常對照組(N組)、低氧高二氧化碳2周組(H2w組)、低氧高二氧化碳4周組(H4w組)、低氧高二氧化碳4周+葛根素干預組(H4w+G組)。將后三

2、組大鼠放入常壓低氧高二氧化碳艙內，艙內氧氣濃度維持在8.5％～11％，二氧化碳濃度維持在5.0％～6.5％(艙內水蒸汽用無水氯化鈣吸收，多余二氧化碳用氫氧化鈉吸收)，每天8小時，每周6天。H4w+G組于每日進艙前半小時腹腔注射葛根素(50 mg/kg)，N組置于艙外，自由呼吸空氣，其他組飼養(yǎng)條件相同。動物飼養(yǎng)到規(guī)定時間后，行腹腔麻醉，采用右心導管法測量平均肺動脈壓(mPAP)，頸總動脈插管測量平均頸動脈壓(mCAP)，分別稱取右心室游離

3、壁(RV)和左心室加室間隔(LV+S)重量；HE染色測量肺細小動脈管壁面積/管總面積[(WA/TA)％]。以mPAP、mCAP、RV/(LV+S)％、(WA/TA)％作為判斷模型建立成功的指標。以RV/(LV+S)％作為反映右心室肥大的指標。免疫組織化學技術檢測肺細小動脈壁CTGF蛋白表達，逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)測定肺組織中TGF-β1 mRNA及CTGF mRNA的變化情況。 結果： ①H2w組大鼠mPA

4、P、RV/(LV+S)％及(WA/TA)％分別為(16.77±0.96)mm Hg、(30.19±0.95)％和(45.37±1.28)％，與N組[(10.56±0.63)mm Hg、(22.00±0.66)％和(28.30±0.87)％]相比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)：H4w組大鼠mPAP、Rv/LV+S)％及(WA/TA)％分別為(23.16±0.59)mm Hg、(36.04±0.65)％和(55.95±1.32)％

5、，分別與N組、H2w組相應數(shù)值比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)。 ②各組大鼠肺細小動脈顯微結構的變化：光鏡下可見N組與細支氣管伴行的肺細小動脈內彈力板自然彎曲，平滑肌層未見明顯增厚，管壁均勻一致，隨著低氧高二氧化碳時間的延長，H2w組、H4w組與細支氣管伴行的肺細小動脈內彈力板逐漸扭曲，中膜平滑肌層明顯增厚，平滑肌細胞增生，管壁厚薄不均，管腔呈偏心狀狹窄。③肺細小動脈壁CTGF蛋白表達情況： N組呈弱陽性表達(0.11

6、9±0.009)，H2w組上升至0.155±0.012，與N組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；H4w組進一步升高至0.173±0.066，分別與N組、H2w組相比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)。④肺組織TGF-β1mRNA相對含量： N組呈基礎量表達，相對含量為0.28±0.05，H2w組上調至0.74±0.07，與N組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；H4w組進一步升高，相對含量值為1.05±0.06，分別與N

7、組、H2w組相比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)。⑤肺組織CTGF mRNA相對含量：N組呈基礎量表達，相對含量為0.34±0.04，H2w組上調至0.65±0.05，與N組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；H4w組進一步升高，相對含量值為1.10±0.07，分別與N組、H2w組相比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)。⑥H4w+G組mPAP、RV/(LV+S)％、(WA/TA)％、肺細小動脈壁CTGF蛋白表達量、肺組

8、織TGF-β1 mRNA和CTGF mRNA相對含量分別為(18.13±0.68)mm Hg、(31.81±0.76)％、(51.60±1.17)％、0.156±0.058、0.89±0.09、0.80±0.04，與H4w組相應數(shù)值比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)。⑦相關性分析：在各組低氧高二氧化碳性肺動脈高壓大鼠中，肺細小動脈壁CTGF表達量均與肺動脈壓力、肺細小動脈管壁面積比值、右心指數(shù)呈正相關(r分別為0.898、0.8