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1、目的:通過(guò)對(duì)可手術(shù)胃癌臨床資料的回顧,分析胃癌的臨床病理特征、治療療效及預(yù)后因素,建立胃癌的預(yù)后模型。檢測(cè)與胃癌進(jìn)展相關(guān)的分子指標(biāo),分析其臨床預(yù)后價(jià)值。在胃癌細(xì)胞系中檢測(cè)相關(guān)基因在轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平的表達(dá)情況。 材料與方法:收集中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院1999年至2002年采取以手術(shù)為主綜合治療的原發(fā)性胃癌患者1043例,分析其臨床病理特征、治療情況及預(yù)后。收集1999年至2006年1284例以手術(shù)為主綜合治療患者臨床資料隨機(jī)分為訓(xùn)練組(
2、963例)和驗(yàn)證組(321例),在訓(xùn)練組中確定胃癌預(yù)后指數(shù)建立胃癌預(yù)后模型,并在驗(yàn)證組中評(píng)估預(yù)后模型的臨床應(yīng)用價(jià)值。收集1999年至2000年間胃癌根治術(shù)后無(wú)輔助治療的患者89例臨床資料及石蠟包埋的腫瘤組織,在病理切片上應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)Aurora-A、VEGF-A、VEGF-D/VEGFR-2、VEGFR-3蛋白表達(dá),并分析其表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性。所有患者的隨訪結(jié)果均通過(guò)電話或通信獲得。統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS13.0軟件
3、。計(jì)數(shù)資料的比較采用卡方檢驗(yàn),獨(dú)立樣本的非參數(shù)的檢驗(yàn)采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)或Kruskal-WallisH檢驗(yàn)。蛋白表達(dá)與臨床病理特征的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析;臨床病理特征與預(yù)后的相關(guān)性分析采用Logistic回歸分析,中位生存期及總生存的分析采用Lifetable法或Kaplan-Meier法;生存曲線差異的比較采用Log-rank檢驗(yàn);對(duì)于單因素分析有意義的預(yù)后因素,采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行多因素分析。
4、P值為雙側(cè)性、小于0.05,認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在8種胃癌系(AGS、MGC803、MKN45、BGC823、SUN-5、N87、SNU-16和SGC7901)中用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)Aurora-A、VEGF-A及VEGF-D基因的mRNA表達(dá),用蛋白免疫印跡(Westernblot)檢測(cè)相應(yīng)蛋白的表達(dá)。 結(jié)果:1043例以手術(shù)為主的胃癌綜合治療患者腫瘤原發(fā)部位以近端最為常見(jiàn)(占46.8%),男性胃癌以近端胃癌常見(jiàn)(占51.9%)
5、,女性胃癌以遠(yuǎn)端胃癌常見(jiàn)(占39.7%)。病理類型以腺癌常見(jiàn)(占77.9%),病理分期以Ⅲ/Ⅳ期常見(jiàn)(占69.1%)?;颊叩闹形簧嫫诤蜔o(wú)復(fù)發(fā)生存期分別是39.5個(gè)月和22.7個(gè)月,5年總生存和無(wú)復(fù)發(fā)生存分別為39%和15%。根據(jù)臨床病理分期,0期、ⅠA期、ⅠB期、Ⅱ期、ⅢA期、ⅢB期、Ⅳ期的5年生存率分別是100%、91%、84%、61%、33%、19%和5%。Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型顯示,患病年齡(≤60歲或>60歲)、原發(fā)腫瘤部位(近端
6、或非近端)、腫瘤大小(≤10cm或>10cm)、病理分期(Ⅰ/Ⅱ期或Ⅲ/Ⅳ期)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比例(≤1/3或>1/3)、腹腔轉(zhuǎn)移(有或無(wú))、根治性手術(shù)(有或無(wú))及綜合治療(有或無(wú))是影響總生存的獨(dú)立預(yù)后因素。原發(fā)腫瘤部位和病理分期是影響無(wú)復(fù)發(fā)生存的獨(dú)立預(yù)后因素。訓(xùn)練組患者(n=963)的Logistic風(fēng)險(xiǎn)回歸分析顯示,患病年齡、原發(fā)腫瘤部位、病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比例、腹腔轉(zhuǎn)移、根治性手術(shù)和綜合治療是獨(dú)立的預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)因素。權(quán)衡5個(gè)非治療性預(yù)
7、后因素的相對(duì)死亡風(fēng)險(xiǎn),獲得預(yù)測(cè)風(fēng)險(xiǎn)因素方程=年齡+部位+(病理分期+淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比例+腹腔轉(zhuǎn)移)×2。根據(jù)有無(wú)不良預(yù)后因素(有記錄為1分,無(wú)記錄為0分)進(jìn)入方程,得到胃癌預(yù)后指數(shù)為0~8分,根據(jù)預(yù)后指數(shù)確定4個(gè)風(fēng)險(xiǎn)組,分為低危組(L)0~1分、低中危組(LI)2~3分、高中危組(HI)4~5分和高危組(H)6~8分。在訓(xùn)練組中建立的、由胃癌預(yù)后指數(shù)確定的風(fēng)險(xiǎn)組,能識(shí)別驗(yàn)證組(n=321)和全部患者(n=1284)中不同死亡風(fēng)險(xiǎn)的患者。全部
8、患者中,低危組、低中危組、高中危組和高危組的5年總生存分別為81%、53%、22%和4%。在IB-Ⅳ期的患者中,由預(yù)后指數(shù)確定的風(fēng)險(xiǎn)組能識(shí)別同一病理分期不同預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)患者的生存情況。在89例胃癌根治術(shù)后無(wú)輔助治療的患者中,Aurora-A、病理分期和脈管瘤栓是影響患者生存的獨(dú)立預(yù)后因素(P值分別是0.001,<0.001和0.007)。胃癌細(xì)胞系研究顯示,在蛋白水平上,Aurora-A和VEGF-D在不同分化類型的細(xì)胞系中存在不同程度的表
9、達(dá),VEGF-A在低分化細(xì)胞系上呈相對(duì)較高的表達(dá)。在基因轉(zhuǎn)錄水平上,Aurora-A在中高分化細(xì)胞株上表達(dá)相對(duì)較高,VEGF-A在低分化細(xì)系上表達(dá)相對(duì)較高,VEGF-D在中低分化細(xì)胞系中表達(dá)相對(duì)較高。 結(jié)論:患病年齡、原發(fā)腫瘤部位、腫瘤大小、病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比例、腹腔轉(zhuǎn)移、根治性手術(shù)及綜合治療是胃癌獨(dú)立的臨床預(yù)后因素。由胃癌預(yù)后指數(shù)確定的預(yù)后模型能識(shí)別不同相對(duì)死亡風(fēng)險(xiǎn)的患者,并能預(yù)測(cè)IB-Ⅳ期同一病理分期內(nèi)不同預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)的患者
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