姜黃素對卵巢癌細胞增殖、凋亡的影響及其分子機制的研究.pdf

1、華中科技大學碩士學位論文姜黃素對卵巢癌細胞增殖、凋亡的影響及其分子機制的研究姓名：鄭麗端申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：吳翠環(huán)20040401華中科技大學同濟醫(yī)學院碩士學位論文姜黃素對卵巢癌細胞增殖、凋亡的影響及其分子機制的研究中文摘要【目的】探討姜黃素對人類卵巢癌的體外治療效應及其分子機制?！痉椒ā?1)10pmol／L50pJnol／L姜黃素作用于人卵巢癌細胞株A27806h24h后，MTT比色法檢測癌細胞增殖活

2、性，倒置顯微鏡下觀察癌細胞形態(tài)學變化，流式細胞儀技術分析細胞周期時相；(2)采用流式細胞儀、DNALadder、透射電鏡、末端TdT酶標記技術、吖啶橙一溴化乙啶熒光染色法檢測姜黃素對卵巢癌細胞的誘導凋亡效應及其比率。(3)采用免疫組織化學sP法檢測姜黃素對卵巢癌細胞Bcl2、P53、MDM2、Caspase3、NF—xB(P65)蛋白表達的影響?！窘Y(jié)果】(1)10plnol／L50pmol／L姜黃素作用6h24h后，A2780細胞生長抑

3、制率為6205％一8924％，并呈時間、濃度依賴性特點；部分癌細胞體積縮小，形態(tài)變不規(guī)則，卵圓形細胞居多：A2780細胞發(fā)生G。／G。期阻滯。(2)A2780細胞經(jīng)109mol／L一509mol／L姜黃素分別作用12h后，在DNA直方圖上可見明顯的“亞G1期”凋亡峰，峰值大小隨藥物濃度增加而遞增；在瓊脂糖凝膠電泳圖上可見180—200bp大小的“梯型”條帶；透射電鏡下可見部分細胞呈現(xiàn)較為典型的凋亡形態(tài)學改變；細胞凋亡率為641％2848

4、％(Po01)。(3)各濃度的姜黃素作用12h后，細胞爬片上卵巢癌細胞中Bcl一2、P53蛋白表達下調(diào)(P001)，并呈濃度依賴性，而MDM2蛋白表達水平無明顯變化。同時，癌細胞中NF—xB蛋白(P65)表達下調(diào)、Caspase一3水平上調(diào)，并呈時間和濃度依賴性fPo01)?！窘Y(jié)論】姜黃素能通過降低癌細胞增殖活性、阻滯細胞于co／6。期等機制顯著抑制卵巢癌細胞株A2780的體外生長活性；通過下調(diào)Bcl一2、P53、NF—xB基因表達，上