梨極矮化突變體S基因型鑒定與DELLA蛋白編碼基因的克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以延邊小香水梨實生后代中發(fā)現(xiàn)的矮化緊湊的突變體等17個梨屬砧木及延邊地區(qū)栽培梨品種為試材,應用PCR擴增及克隆、測序技術(shù)分離其S基因,使用生物信息學軟件對各序列進行分析和同源性搜索比對,最終確定各品種的S基因型,初步推測梨極矮化突變體親本;應用RT-PCR、cDNA末端快速擴增技術(shù)(RACE)克隆梨極矮化突變體和蘋果梨DELLA家族蛋白編碼基因的編碼區(qū)全長。主要研究結(jié)果如下:
  梨矮化突變體等17個梨屬砧木及延邊地區(qū)栽培梨

2、品種的S基因型分別為:“極矮化突變體”、“蘋果梨”、“東寧五號大梨”、“延光梨”、“S2(中矮一號)”、“S7”為 S1S17;“蘋博香”為 S1S8m;“早酥”為 S1Sd;“延邊謝花甜”、“S5”為 S17S31;“尖把梨”為 S12S30;“延邊明月梨”為 S3Se;“小香水芽變”為 SeSx;“朝鮮洋梨”為 SeS3;“身不知”為 S5Sd;“PDR54(中矮二號)”為 S4S8S17;“山梨”為 S12Sx。其中“蘋博香”的S

3、8m為新基因,“PDR54”為三倍體。
  利用 RACE技術(shù)從梨極矮化突變體中克隆到一個編碼 DELLA家族蛋白的全長cDNA序列,命名為PuRGL。該基因全長1743bp,包含一個完整的編碼580個氨基酸的開放閱讀框(ORF)。PuRGL與MdRGL2a、MhGAI、RcGAI、PtRGAS、AtRGL2的同源性分別為98%、98%、82%、81%、77%;結(jié)構(gòu)分析表明該基因具有DELLA家族蛋白的典型結(jié)構(gòu)域。
  利用

4、 RACE技術(shù)從蘋果梨中克隆到兩個編碼 DELLA家族蛋白的全長 cDNA序列,分別命名為PbRGL1和PbRGL2。PbRGL1全長1755bp,包含一個完整的編碼584個氨基酸的ORF,PbRGL1與MdRGL2b、MhGAI、RcGAI、PtGAS、AtRGL2的同源性分別為99%、93%、83%、82%、78%、78%;PbRGL2全長1743bp,包含一個完整的編碼580個氨基酸的ORF,PbRGL2與MdRGL2a、MhGA

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