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1、河南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化懷地黃突變體鑒定與基因克隆姓名:姚換靈申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:周延清20100501ABSTRACTTheobjectivesofthisstudyaretopropagate,transplant,plantandcharacterizethevariantsofRehmanniaglutinosa,huenchingensis(ChartetSechih)Hsiao(calle
2、dvariantsforshortbelow)HWdevelopedbyAgrobacteriumrhizogenesmediatedtransformationandplanttissueculture,andtocloneitsnewgenefragmentinordertolaythefoundationforitsbiotechnologicalbreedingandgeneresearchl、Establishedtheirp
3、ropagationandtransplantations)rstem,successfullyaccomplishedtheircultivationandcharacterizedthembymeansoftheirmorphologicaltraits,chlorophyllcontent,reducingsugarandtotalsugarcontent,freshtuberweightandtubernumberperplan
4、t,theabilitiestodedifferentiateandredifferentiateandDNAvariationanalysisIntermsofmorphologytheleavesofthevariantsturnupwhilethatof855(CK)droop,andtheleavesofthevariantsarelongerandwiderthanthatof855(CK)thevariantsare髂hig
5、hasorhigherthan85—5(CK),ofwhichvariantHW7andvariantHW8arethehighest,35cmhighAmong12variantstested,thechlorophyllcontentsof7onesarehigherthanthatof855(CK),where嬲thatof50nesarelowerthanthatof855(CK),nletotalsugarcontentsof
6、allthefivevariantstestedarehigherthanthatof855(CK),butthereducingsugarcontentsoffourvariantstestedaresshighasorhigherthanthatof855(CK),andthatofoneislowerthanthatof855(CK)Thefreshtuberweightperplantof5variantstestedrange
7、dfrom0465to0742g,ofwhich30nes’freshtuberweightperplantareheavierthanthatof855(CK)andthefreshtuberweightperplantofvariantHW12hasa15%increaseC0111【paredtothatof855(CK)Atthesametime,thetubernumberperplantsofthefivevariantsa
8、leallmorethanthatof855(CK)Foritsabilitiytodedifferentiateandredifferentiate,thecallusinductionpercentageofvariantHW12reached100%equalingtooneCKandmorethantwoCKs,anditsshootdifferentiationpercentagefromitscalluseswasthese
9、condhighestamingthe4CKstestedAttheDNAlevel,onespecificDNAfragmentofabout400bpWasnotamplifiedfromthegenomieDNAof85_5(CK)butthegenomieDNAofvariantHW12byoneSRAPprimercombination(em2/eml7/eml8)2、OnenewgenefragmentanditsownOR
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