Smac在非小細胞肺癌細胞株A549凋亡中的作用探討.pdf_第1頁
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1、南方醫(yī)科大學碩士學位論文Smac在非小細胞肺癌細胞株A549凋亡中的作用探討姓名：成先東申請學位級別：碩士專業(yè)：呼吸病學指導(dǎo)教師：蔡紹曦20080526中文摘要在肺癌中的作用卻鮮有報道，本研究旨在探討Smac在肺癌凋亡中可能的作用機制。方法一、不同濃度順鉑對非小細胞肺癌細胞株A549細胞內(nèi)SmacmRNA及蛋白表達的影響。1、不同濃度順鉑刺激NSCLCA549細胞。2、MTT法檢測細胞增殖抑制率。3、AnnexinVFITC／PI雙染經(jīng)

2、流式細胞儀檢測細胞凋亡率。4、半定量RTPCR技術(shù)檢測細胞內(nèi)SmacmRNA的表達。5、Westernblot檢測細胞內(nèi)Smac蛋白表達水平。二、轉(zhuǎn)染Smac對非小細胞肺癌細胞株A549化療敏感性的影響。1、利用脂質(zhì)體介導(dǎo)將Smac基因轉(zhuǎn)入A549細胞。2、Westemblot檢測轉(zhuǎn)染后細胞內(nèi)Smac蛋白表達水平。3、AnnexinVFITC／PI雙染經(jīng)流式細胞儀檢測細胞凋亡率。三、統(tǒng)計學分析所有原始數(shù)據(jù)采用SPSS100軟件的OneW

3、ayANOVA(LSD／S—NK或DunnettT3)進行統(tǒng)計學分析。P005為差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果一、不同濃度順鉑對tBd細胞肺癌細胞株A549細胞內(nèi)SmacmRNA及蛋白表達的影響。1、細胞增殖的測定：不同濃度順鉑(0、25、5、10gg／m1)作用24小時后，細胞增殖抑制率分別為0、1145113％、2178423％、4835291％，各組間比較有顯著差異(P005)。2、細胞凋亡率的測定：不同濃度順鉑(0、25、5、10pg／

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