粉防己堿對(duì)肺癌細(xì)胞株A549的放射敏感性影響及相關(guān)機(jī)制探討.pdf

1、目的：探討粉防己堿配合X線在體外環(huán)境中對(duì)肺癌細(xì)胞株A549生長(zhǎng)、集落形成、細(xì)胞周期及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)以人肺癌細(xì)胞株A549為研究對(duì)象，以粉防己堿和X射線為處理因素，采用MTT比色實(shí)驗(yàn)觀察Tet對(duì)A549細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng)；利用克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察Tet對(duì)A549細(xì)胞的放射敏感性的影響；細(xì)胞流式術(shù)檢測(cè)A549細(xì)胞在各種因素處理后細(xì)胞周期的分布情況；蛋白印跡試驗(yàn)分析處理因素對(duì)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)

2、果：MTT比色法顯示高劑量的Tet對(duì)肺癌A549細(xì)胞的有明顯的抑制作用，低劑量(0.5～3.4μg/ml)的Tet對(duì)A549細(xì)胞抑制率＜10％，可以作為放射增敏的劑量參考；克隆形成實(shí)驗(yàn)顯示，1μg/ml的Tet配合X射線可以明顯降低A549細(xì)胞的克隆形成率，放射增敏比（SER）為1.46；細(xì)胞流式術(shù)發(fā)現(xiàn)，X射線可以引起 A549細(xì)胞 G2期阻滯，而低劑量（1μg/ml）的Tet可以減少 G2期阻滯，高劑量（10μg/ml）則增加這種阻滯

3、；Western blotting實(shí)驗(yàn)顯示，在接受4Gy的X射線照射后，A549細(xì)胞CyclinB1蛋白表達(dá)水平降低，磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表達(dá)增高，在加用小劑量Tet后CyclinB1蛋白表達(dá)水平增高，磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表達(dá)降低，大劑量（10μg/ml）則相反。
　　結(jié)論：1.粉防已堿可抑制人肺癌細(xì)胞株A549的生長(zhǎng)，其抑制效應(yīng)具有劑量依賴性和時(shí)間依賴性。2.小劑量的粉防己堿可增加X射線對(duì)人肺癌細(xì)胞株