粒細(xì)胞集落刺激因子聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素對(duì)鼠肝損傷療效的觀察.pdf

1、目的:通過(guò)建立小鼠急性肝衰竭模型及大鼠肝纖維化模型，觀察粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素(pHGF)及二者聯(lián)合對(duì)治療急慢性肝損傷模型是否具有保護(hù)及治療作用，從而為肝病的治療提供新的思路。
　　 方法:
　　 (1)用濃度為30％的四氯化碳(CC14)油性混合溶液(5ml/kg)一次性腹腔內(nèi)注射的方法建立小鼠急性肝衰竭模型。將65只小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（5只）、模型對(duì)照組(15只)、rhG-CSF預(yù)處理組

2、（15只）、pHGF預(yù)處理組（15只）及rhG-CSF+pHGF聯(lián)合預(yù)處理組（15只），在CC14處理前24小時(shí)、2小時(shí)及造模時(shí)提前干預(yù)。在CC14處理后24小時(shí)各組隨機(jī)處死5只，做肝功能及肝臟病理檢查，剩余10只用于觀察存活率。比較各組小鼠的一般情況及存活率、肝功能恢復(fù)情況、肝臟病理改變情況。
　　 (2)用硫代乙酰胺(TAA)(250mg/kg)腹腔內(nèi)注射，每周2次，連續(xù)6周的方法建立SD大鼠肝纖維化模型。將30只SD大鼠隨

3、機(jī)分成模型實(shí)驗(yàn)組（26只）及正常對(duì)照組（4只）。在TAA誘導(dǎo)6周后，26只模型實(shí)驗(yàn)鼠中隨機(jī)分出4只大鼠，為模型組(A組)，用于評(píng)價(jià)大鼠肝纖維化模型情況。證實(shí)大鼠肝纖維化模型建模成功后，將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組（4只）、rhG-CSF治療組（6只）、pHGF治療組（6只）及rhG-CSF+pHGF聯(lián)合治療組（6只）。比較各組大鼠的一般情況、肝功能恢復(fù)情況、肝臟病理改變情況。
　　 結(jié)果:
　　 (1)四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠

4、急性肝衰竭:CC14腹腔內(nèi)注射后120小時(shí)內(nèi)模型對(duì)照組小鼠全部死亡(10/10)，肝臟病理組織學(xué)可見大面積肝細(xì)胞壞死，未見明顯肝細(xì)胞再生，CC14腹腔內(nèi)注射后24小時(shí)血清ALT、AST水平相對(duì)正常對(duì)照組明顯增高(2294.8±403.6)u/l vs58.1±26.4)u/l、(5045.6±1690.9)u/lvs(220.6±50.3) u/l(p＜0.05)。與模型對(duì)照組相比，rhG-CSF、pHGF、rhG-CSF+pHGF預(yù)處

5、理組小鼠一般情況均明顯改善;CC14腹腔內(nèi)注射后120小時(shí)小鼠存活率均顯著提高，分別是50％(5/10)、50％(5/10)、60％(6/10)(p＜0.05);肝組織病變程度均明顯減輕，且有較多的肝細(xì)胞再生;CC14腹腔內(nèi)注射后24小時(shí)后小鼠血清ALT、AST水平均明顯降低，分別為(1105.4±81.1)u/l、(894.3±40.5) u/l;(1559.1±197.2)u/l、(1250.4±254.6)u/l;(1152.4±

6、110.4) u/l、(863.5±42.9) u/l(p＜0.05)。但各預(yù)處理組間在CC14腹腔內(nèi)注射后120小時(shí)的存活率、肝組織病變改善程度、血清中轉(zhuǎn)氨酶均無(wú)明顯差別(p＞0.05)。
　　 (2)硫代乙酰胺誘導(dǎo)的大鼠纖維化模型:實(shí)驗(yàn)大鼠在腹腔內(nèi)注射TAA6周后，模型組大鼠一般情況明顯差于正常對(duì)照組，模型組肝功能指標(biāo)ALT較正常對(duì)照組明顯升高(746.5±344.0) u/lvs(48.2±7.5) u/l(p＜0.05)

7、，模型組大鼠肝炎癥活動(dòng)度平均計(jì)分及肝纖維化計(jì)分均較正常對(duì)照組明顯升高(12.15±2.55 vs0.20±0.08，7.65±2.01 vs0.00±0.00)(p＜0.01)，模型組肝纖維化分期為S2-S3。與空白對(duì)照組相比，各治療組結(jié)果顯示一般情況、肝功能指標(biāo)ATL水平(p＞0.05)、大鼠肝炎癥活動(dòng)度平均計(jì)分及肝纖維化計(jì)分均無(wú)明顯差別(p＞0.05)，肝纖維化分期為S1。各治療組間在一般情況、肝功能指標(biāo)、肝臟病理組織學(xué)均無(wú)明顯差別