粒細胞集落刺激因子聯(lián)合促肝細胞生長素對鼠肝損傷療效的觀察.pdf

1、目的:通過建立小鼠急性肝衰竭模型及大鼠肝纖維化模型，觀察粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、促肝細胞生長素(pHGF)及二者聯(lián)合對治療急慢性肝損傷模型是否具有保護及治療作用，從而為肝病的治療提供新的思路。
　　 方法:
　　 (1)用濃度為30％的四氯化碳(CC14)油性混合溶液(5ml/kg)一次性腹腔內(nèi)注射的方法建立小鼠急性肝衰竭模型。將65只小鼠隨機分為正常對照組（5只）、模型對照組(15只)、rhG-CSF預處理組

2、（15只）、pHGF預處理組（15只）及rhG-CSF+pHGF聯(lián)合預處理組（15只），在CC14處理前24小時、2小時及造模時提前干預。在CC14處理后24小時各組隨機處死5只，做肝功能及肝臟病理檢查，剩余10只用于觀察存活率。比較各組小鼠的一般情況及存活率、肝功能恢復情況、肝臟病理改變情況。
　　 (2)用硫代乙酰胺(TAA)(250mg/kg)腹腔內(nèi)注射，每周2次，連續(xù)6周的方法建立SD大鼠肝纖維化模型。將30只SD大鼠隨

3、機分成模型實驗組（26只）及正常對照組（4只）。在TAA誘導6周后，26只模型實驗鼠中隨機分出4只大鼠，為模型組(A組)，用于評價大鼠肝纖維化模型情況。證實大鼠肝纖維化模型建模成功后，將實驗大鼠隨機分為空白對照組（4只）、rhG-CSF治療組（6只）、pHGF治療組（6只）及rhG-CSF+pHGF聯(lián)合治療組（6只）。比較各組大鼠的一般情況、肝功能恢復情況、肝臟病理改變情況。
　　 結果:
　　 (1)四氯化碳誘導的小鼠

4、急性肝衰竭:CC14腹腔內(nèi)注射后120小時內(nèi)模型對照組小鼠全部死亡(10/10)，肝臟病理組織學可見大面積肝細胞壞死，未見明顯肝細胞再生，CC14腹腔內(nèi)注射后24小時血清ALT、AST水平相對正常對照組明顯增高(2294.8±403.6)u/l vs58.1±26.4)u/l、(5045.6±1690.9)u/lvs(220.6±50.3) u/l(p＜0.05)。與模型對照組相比，rhG-CSF、pHGF、rhG-CSF+pHGF預處

5、理組小鼠一般情況均明顯改善;CC14腹腔內(nèi)注射后120小時小鼠存活率均顯著提高，分別是50％(5/10)、50％(5/10)、60％(6/10)(p＜0.05);肝組織病變程度均明顯減輕，且有較多的肝細胞再生;CC14腹腔內(nèi)注射后24小時后小鼠血清ALT、AST水平均明顯降低，分別為(1105.4±81.1)u/l、(894.3±40.5) u/l;(1559.1±197.2)u/l、(1250.4±254.6)u/l;(1152.4±

6、110.4) u/l、(863.5±42.9) u/l(p＜0.05)。但各預處理組間在CC14腹腔內(nèi)注射后120小時的存活率、肝組織病變改善程度、血清中轉氨酶均無明顯差別(p＞0.05)。
　　 (2)硫代乙酰胺誘導的大鼠纖維化模型:實驗大鼠在腹腔內(nèi)注射TAA6周后，模型組大鼠一般情況明顯差于正常對照組，模型組肝功能指標ALT較正常對照組明顯升高(746.5±344.0) u/lvs(48.2±7.5) u/l(p＜0.05)

7、，模型組大鼠肝炎癥活動度平均計分及肝纖維化計分均較正常對照組明顯升高(12.15±2.55 vs0.20±0.08，7.65±2.01 vs0.00±0.00)(p＜0.01)，模型組肝纖維化分期為S2-S3。與空白對照組相比，各治療組結果顯示一般情況、肝功能指標ATL水平(p＞0.05)、大鼠肝炎癥活動度平均計分及肝纖維化計分均無明顯差別(p＞0.05)，肝纖維化分期為S1。各治療組間在一般情況、肝功能指標、肝臟病理組織學均無明顯差別