粒細胞集落刺激因子修復(fù)大鼠動脈損傷的實驗研究.pdf

1、目的:血管損傷所致內(nèi)皮層完整性斷裂在其后的新生內(nèi)膜增生過程中起著重要作用。因此，再內(nèi)皮化是抑制新生內(nèi)膜增生的一個決定因素。本試驗觀察粒細胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor，G-CSF)動員循環(huán)CD34<'+>細胞加速大鼠損傷動脈的再內(nèi)皮化，從而抑制新生內(nèi)膜增生的效果。 方法:隨機將SD大鼠分成治療組及對照組，每組20只。治療組給予皮下注射重組人粒細胞集落刺激因子(100μg

2、/kg)，1次/d，共8 d。對照組皮下注射等量生理鹽水。治療5d后，腹腔注射麻醉大鼠，頸部沿腹部正中線切開，暴露左頸動脈，將2F動脈取栓導(dǎo)管插入至左頸總動脈分叉處，注入200μL空氣使球囊擴張，然后回拉球囊至肩胛舌骨肌處，回抽空氣后重新送回導(dǎo)管，反復(fù)3次后拔出導(dǎo)管，結(jié)扎頸外動脈。①治療前和治療5d后，所有大鼠均取1mL靜脈血進行白細胞和CD34<'+>細胞計數(shù)。②球囊損傷后14和28d，每組麻醉后分別處死大鼠10只，取左頸總動脈。每組

3、各5只用于暴露動脈內(nèi)膜腔，應(yīng)用圖形分析軟件計算再內(nèi)皮化面積，再內(nèi)皮化面積=未被伊文氏藍著色區(qū)域/損傷總面積；每組另有5只，取左頸總動脈，取血管橫切面，經(jīng)HE染色后用圖像分析軟件計算新生內(nèi)膜與中膜比(I/M)，評估新生內(nèi)膜增生程度。③采用免疫組化方法檢測血管內(nèi)膜CD31<'+>與vWF<'+>細胞，評估損傷血管再內(nèi)皮化程度。 結(jié)果:①外周血白細胞數(shù)及CD34<'+>細胞數(shù)：治療5d后，治療組大鼠白細胞總數(shù)高于對照組2.7倍[(27

4、.60±2.45)×10<'9>L<'-1>，(10.11±1.81)×10<'9>L<'-1>，P<0.01]，CD34<'+>細胞數(shù)量高于對照組12.2倍[(38.31×10<'7>L<'-1>，3.14×10<'7>L<'-1>，P<0.01)]。②血管再內(nèi)皮化程度：球囊損傷后14和28d，治療組再肉皮化面積分別為(68.3±8.3)％，(97.6±4.1)％，高于對照組[(33.8±6.3)％，(76.1±5.2)％，P<0.0

5、1]。③新生內(nèi)膜增生程度：球囊損傷后14，28d，治療組新生內(nèi)膜與中膜比分別為0.39±0.11，0.45±0.09，均低于對照組(0.87±0.15，1.26±0.16，P<0.01)，治療組血管新生內(nèi)膜增生程度被顯著抑制。④血管內(nèi)膜CD31<'+>與vWF<'+>細胞：球囊損傷后28d，治療組血管內(nèi)膜被接近于連續(xù)完整的CD31<'+>與vWF<'+>細胞覆蓋，對照組血管內(nèi)膜僅見零星、分散的CD31<'+>與vWF<'+>細胞。