胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下大鼠心肌細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4變化的研究.pdf

1、胰島素抵抗是高血壓病、糖尿病、高脂血癥等疾病的重要的病理生理基礎(chǔ)，是體內(nèi)代謝紊亂重要的表現(xiàn)和發(fā)病機(jī)制。糖尿病性心肌病變是心肌細(xì)胞代謝紊亂所致。葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4分布在骨骼肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞內(nèi)，是心肌細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的重要的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。最近的研究表明，在胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下，骨骼肌細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4的表達(dá)水平下降。但目前在胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下對(duì)心肌細(xì)胞的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4的表達(dá)水平的研究甚少。 實(shí)驗(yàn)材料與方法： 取雄性Wistar大鼠

2、(由中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供)30只，以隨機(jī)的方式分成對(duì)照組、高脂組、高脂高糖組，分別給予基礎(chǔ)飲食：蛋白質(zhì)21％、脂肪19％、碳水化合物60％，高脂飲食：蛋白質(zhì)21％、脂肪60％、碳水化合物19％、高脂高糖飲食：蛋白質(zhì)21％、脂肪60％、碳水化合物19％、額外加蔗糖40克；喂養(yǎng)8周以建立胰島素抵抗大鼠模型，以“鉗夾技術(shù)”檢測胰島素抵抗的存在，并計(jì)算出葡萄糖攝取率。檢測后取大鼠動(dòng)脈血5ml，以取上清液，用酶聯(lián)免疫方法檢驗(yàn)血糖；處死

3、實(shí)驗(yàn)大鼠，取心肌標(biāo)本，以4％多聚甲醛固定，時(shí)間在24小時(shí)之內(nèi)，經(jīng)系列脫水、透明、浸臘后常規(guī)石蠟包埋，進(jìn)行原位雜交的方法檢測心肌細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4mRNA的表達(dá)水平。對(duì)陽性細(xì)胞的著色率進(jìn)行計(jì)數(shù)，所有測得指標(biāo)連續(xù)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示，進(jìn)行方差分析并進(jìn)行組間的兩兩比較；進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并對(duì)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析。所有的統(tǒng)計(jì)分析由SPSS軟件包完成。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1、體重 高脂組與高脂高糖組Wistar大

4、鼠的體重明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，高脂高糖組大鼠的體重高于高脂組(P<0.05)； 2、血糖 在對(duì)照組、高脂組、高脂高糖組大鼠的血糖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)； 3、葡萄糖攝取率對(duì)照組大鼠葡萄糖的攝取率明顯高于高脂組和高脂高糖組(P<0.05)，而高脂組的葡萄糖攝取率又高于高脂高糖組(P<0.05)； 4、GLUT4 mRNA在大鼠心肌細(xì)胞上的表達(dá)在對(duì)照組大鼠心肌細(xì)胞GLUT4 mRNA的表達(dá)明顯

5、高于高脂組和高脂高糖組(P<0.05)，高脂組的GLUT4 mRNA的表達(dá)明顯高于高脂高糖組(P<0.05)； 5、相關(guān)性分析葡萄糖攝取率和大鼠的體重呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=-0.849(P<0.05)；GLUT4mRNA在心肌細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)和葡萄糖攝取率呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.819(P<0.05)。 結(jié)論： 1、高脂飲食和高脂高糖飲食喂養(yǎng)大鼠8周可建立可靠的胰島素抵抗模型。 2、胰島素抵抗可導(dǎo)致心肌細(xì)胞