核因子-κB、環(huán)氧合酶-2和單核細(xì)胞趨化蛋白-1在結(jié)腸炎模型鼠腸粘膜中的表達(dá)與關(guān)系.pdf

1、目的：研究核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)、環(huán)氧合酶-2(COX-2)和單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)在結(jié)腸炎模型鼠腸粘膜中的表達(dá)及相互關(guān)系。 方法：將60只雄性SD大鼠稱重、編號(hào)，隨機(jī)分為2組，每組30只。一組作正常對(duì)照組，另一組利用三硝基苯磺酸 (2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)乙醇溶液直腸注入制備結(jié)腸炎大鼠模型。給藥兩周后取肛門(mén)以上全結(jié)腸組織，H-E染色，在光鏡下觀察結(jié)腸

2、組織病理學(xué)變化；采用S-P免疫組織化學(xué)方法對(duì)雄性SD大鼠模型組及正常對(duì)照組結(jié)腸組織標(biāo)本中NF-κB、COX-2和MCP-1的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，采用計(jì)算機(jī)圖像系統(tǒng)檢測(cè)各組指標(biāo)的積分光密度值進(jìn)行半定量分析，同時(shí)分析三者的相關(guān)性：將模型組按光鏡下病理評(píng)分進(jìn)行分度，分析不同疾病程度的NF-κB、COX-2和MCP-1陽(yáng)性細(xì)胞平均數(shù)積分光密度與疾病程度的相關(guān)性。 結(jié)果： TNBS制備結(jié)腸炎模型，病變持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，以潰瘍形成為主要表現(xiàn)，是研究炎

3、癥性腸病的成熟模型。本試驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M30例大鼠，均造模成功。2周后模型組結(jié)腸粘膜出現(xiàn)程度不等的壞死、潰瘍，組織增生，腸壁增厚，腸腔變小。HE染色示正常對(duì)照組結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)正常，模型組出現(xiàn)全結(jié)腸、全層性炎癥，組織粘膜出現(xiàn)壞死、潰瘍，隱窩膿腫，伴有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。根據(jù)病理評(píng)分將模型組分為輕型7例，中型19例，重型4例。NF-κB主要表達(dá)于胞核；COX-2租MCP-1主要表達(dá)于胞漿。模型組結(jié)腸組織中的NF-κB p65、COX-2和MCP-1的表

4、達(dá)明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)。模型組的 COX-2蛋白表達(dá)與NF-κB p65呈正相關(guān)(r=0.52，P<0.05)；模型組 MCP-1表達(dá)與NF-κB p65蛋白亦呈正相關(guān)(r=0.87，P<0.05)。模型組結(jié)腸粘膜NF-κd3、COX-2和MCP-1表達(dá)均與疾病嚴(yán)重程度正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為：r=0.782，P<0.05：r=0.563，P<0.05；r=0.754，P<0.05。NF-κBp65的表達(dá)病情重度、中度與輕度

5、比較(39.7195±12.6728，33.1449±10.6429對(duì)22.4682±6.3794)，差異顯著(P<0.05)；COX-2的表達(dá)病情重度、中度與輕度比較(10.0104±0.7518，9.7280±1.1416對(duì)8.3649±0.8104)，差異顯著(P<0.01)；MCP-1的表達(dá)病情重度、中度與輕度比較(11.0002±1.0791，8.3498±1.9246對(duì)6.0419±1.3109)，差異顯著(P<0.01)。

6、 結(jié)論： COX-2、NFκB及MCP-1在模型組結(jié)腸組織中表達(dá)明顯增高(P<0.01)。模型組結(jié)腸組織中COX-2和MCP-1的表達(dá)均與NF-κAB的表達(dá)呈正相關(guān)，COX-2和MCP-1的基因的啟動(dòng)子含NF-κB結(jié)合位點(diǎn)，NF-κB可能激活、誘導(dǎo)了COX-2、MCP-1的高表達(dá)，COX-2、MCP-1是否對(duì)NF-κB有激活作用，有待進(jìn)一步研究。模型組結(jié)腸粘膜NF-κB、COX-2和MCP-1表達(dá)均與疾病嚴(yán)重程度正相關(guān)，提示三者