熱休克蛋白HSP32、HSP27在食管鱗癌轉移中作用的研究.pdf

1、食管癌是最常見的消化道惡性腫瘤之一，我國食管癌患者的死亡率為15.15/10萬人[1]，5年生存率僅5％～10％，其中95%的臨床病理學特征為鱗癌。死亡的重要因素是早期即出現侵襲和轉移，其作用機制仍不明確，涉及到腫瘤細胞與宿主之間的相互作用，可能與多種基因及蛋白質的表達相關。
　　熱休克蛋白是一類高度進化保守的應激蛋白，可被多種刺激誘導合成產生，如腫瘤、缺氧和其他化學刺激。其參與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、免疫逃逸、治療及預后等過程。近年來，

2、大量研究表明熱休克蛋白家族中的 HSP32、HSP27，可能參與了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程，然而關于 HSP32、HSP27在食管鱗癌侵襲轉移中的作用并未見報道。
　　目的:
　　研究熱休克蛋白HSP32、HSP27在食管鱗癌侵襲轉移中的作用。
　　方法:
　　1.免疫組織化學方法檢測食管鱗癌組織中HSP32、HSP27的表達，并分析其與臨床病理資料的相關性；
　　2.利用體外細胞劃痕、Transwell實驗

3、檢測食管鱗癌高低轉移細胞亞系轉移潛能的差異；
　　3. Western blot和qRT-PCR測定HSP32、HSP27在食管鱗癌不同轉移潛能細胞亞系中表達水平的變化，分析HSP32、HSP27在食管鱗癌侵襲轉移中的作用；
　　4.利用慢病毒轉染技術上調HSP27在高轉移潛能細胞亞系中的表達水平，通過體外Transwell、細胞劃痕實驗及體內裸鼠轉移實驗，觀察HSP27上調后食管鱗癌細胞侵襲轉移能力的變化；
　　結果

4、:
　　1. HSP32在食管鱗癌組織中呈高表達，其陽性表達率與腫瘤分化程度（P=0.039）、浸潤程度T分期（P=0.020）、淋巴結轉移(P=0.017)、淋巴管浸潤(P=0.037)、遠處轉移(P=0.038)有顯著相關性；HSP27在食管鱗癌組織中表達水平降低，其表達與腫瘤分化密切相關(P=0.023),與TNM分期(P=0.013),淋巴結轉移(P=0.020)和遠處轉移(P=0.017)有關,而與性別(P=0.752)

5、和患者的年齡(P=0.771)無顯著相關性；
　　2. EC9706-H、EC109-H細胞亞系侵襲轉移能力高；EC9706-L、EC109-L細胞亞系侵襲轉移能力低；
　　3. HSP32在兩對高轉移潛能細胞亞系中表達水平較相應的低轉移細胞亞系表達升高；HSP27在兩對高轉移潛能細胞亞系中表達水平較相應的低轉移細胞亞系表達降低；
　　4.利用慢病毒轉染技術特異性上調了高轉移潛能細胞亞系中HSP27的表達水平，細胞劃痕

6、實驗和Transwell實驗證實其侵襲轉移能力下降；
　　5.體內裸鼠轉移實驗證實，在高轉移潛能細胞亞系中上調HSP27表達后，食管鱗癌細胞的體內侵襲和轉移能力下降；
　　結論:
　　1. HSP32、HSP27與食管鱗癌的侵襲轉移密切相關，但不同蛋白所起的作用并不相同。HSP32的表達水平與食管癌淋巴結轉移呈正相關，HSP27的表達水平與食管鱗癌淋巴結轉移呈負相關；
　　2.上調 HSP27表達水平后，能在體內