HSP27在大鼠磨牙及其發(fā)育中的分布研究.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文HSP27在大鼠磨牙及其發(fā)育中的分布研究姓名：梁朝霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：口腔內(nèi)科指導(dǎo)教師：李瑛20050414山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文H s p 2 7 在大鼠磨牙及其發(fā)育中的分布研究摘要目的：通過(guò)分析大鼠磨牙及其發(fā)育過(guò)程中，H s p 2 7 在成釉器中的表達(dá)，闡明H s p 2 7 在牙釉質(zhì)、牙本質(zhì)形成中的作用。方法：( 1 ) 為了獲取胚胎鼠的牙胚，將懷孕1 7 天的W i s t a r 大鼠一只，頸

2、部脫臼處死，切取包括牙胚在內(nèi)的周?chē)M織。然后將其浸入冰冷的4 0 9 ／L0 ．1 M 多聚甲醛磷酸緩沖液中，4 ℃下固定2 4 小時(shí)( P H 7 ．3 1 。( 2 ) 2 8 只W i s t a r雌鼠( 1 ，5 ，1 l ，1 4 ，2 1 ，3 0 ，1 0 0 天，各4 只) 斷頭處死后，將分離的下頜骨浸入同樣的固定液中，于4 ℃下固定2 4 小時(shí)( P H 7 ．3 ) 。隨后，在1 5 ％的E D T A 脫鈣液中，

3、于4 ℃脫鈣l —l O 周( 3 ) 將來(lái)自于胎鼠的牙胚及幼鼠和成鼠的下頜骨制備成石蠟切片，然后，用H s p 2 7 多克隆抗體，采用S A B C 法，對(duì)每張切片進(jìn)行免疫組化。隨后做圖像分析測(cè)定不同發(fā)育階段的成釉細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞、無(wú)釉區(qū)細(xì)胞的免疫表達(dá)水平，所得數(shù)據(jù)用S P S S l l ．5 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：( 1 ) 在成釉細(xì)胞形成過(guò)程中，H s p 2 7 首先出現(xiàn)在前成釉細(xì)胞中，在釉質(zhì)分泌階段和成熟階段，H s

4、p 2 7 的陽(yáng)性免疫反應(yīng)逐步增強(qiáng)( 1 天，0 ．2 5 0 4 8 ±0 ．0 0 7 4 1 1 ；5 天，0 ．2 9 4 5 6 ±0 ．0 1 1 3 2 8 ：1 1 天，0 ．3 6 3 9 8 i 0 ．0 0 8 0 3 9 P 分別0 ．0 5 ) 。但在1 4 天以后又伴隨凋亡而減少( 1 4 無(wú)0 ．2 7 6 7 4 ±0 ．0 4 3 1 0 8 P < 0 ．0 1 )