裕丹參多倍體誘導及其生物學特性研究.pdf

1、裕丹參(Salvia miltiorrhiza Bge.)產(chǎn)于南陽方城縣，為著名的道地中藥材，品質(zhì)優(yōu)異、療效顯著，但長期以來以分根的方式進行營養(yǎng)繁殖，導致種性退化、抗逆性減弱、產(chǎn)量和品質(zhì)下降，因此本實驗以培育長勢旺、抗逆性強、產(chǎn)量和品質(zhì)優(yōu)的多倍體株系為目的，對裕丹參進行多倍化遺傳改良。研究結(jié)果如下:
　　1.無菌體系的建立。以田間生長的裕丹參頂芽為外植體，用75％乙醇浸泡結(jié)合0.1％氯化汞溶液消毒獲得無菌苗，氯化汞浸泡時間為7 m

2、in時無菌苗得率最高。
　　2.試管苗快繁體系的建立。以MS添加不同植物生長物質(zhì)組合來配制培養(yǎng)基，將帶芽莖段轉(zhuǎn)入其中，根據(jù)植株的株高、繁殖系數(shù)及長勢，確定最佳快繁培養(yǎng)基為MS+GA0.5mg/L+NAA0.005 mg/L+6-BA0.04 mg/L，繁殖系數(shù)達5.11，繁殖周期為30d，年繁殖量理論上可達3.1億株以上。
　　3.多倍體的誘導與鑒定。以裕丹參帶芽莖段為外植體，采用培養(yǎng)基中添加秋水仙素的方法進行多倍體誘導，通

3、過鑒定獲得了4個多倍體株系，200 mg/L的秋水仙素處理12d時誘導率最高。與對照相比多倍體株系長勢更旺，葉片肥大、色深，莖更粗;葉片下表面單個視野氣孔數(shù)減少61.54％，氣孔長、寬分別增加了116.2％和63.8％;染色體數(shù)目增加一倍（為32條，而對照為16條）;DNA含量增加了一倍。
　　4.不同倍性植株P(guān)OD和SOD同工酶酶譜的比較。用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離同工酶并進行染色后結(jié)果顯示，多倍體POD同工酶酶譜比二倍體多了一條

4、譜帶，且顏色更深，SOD同工酶酶譜也多了一條譜帶，且譜帶更亮。
　　5.不同倍性試管苗低溫耐性的比較。在低溫下，多倍體試管苗葉片SOD、POD、CAT、APX、GR活性、游離脯氨酸、可溶性蛋白及葉綠素含量始終比二倍體對照高，而MDA含量始終較低，表明裕丹參多倍體的低溫耐性更強。
　　6.不同倍性植株大田適應(yīng)性比較。多倍體植株在大田經(jīng)過一段時間的生長，其株高、冠幅、最大葉長葉寬、莖粗均大于二倍體對照，而葉形指數(shù)小于或接近對照;