TSHR基因內(nèi)含子1區(qū)域基因多態(tài)性與Graves病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：①探討中國山東臨沂地區(qū)漢族人群Graves病患者促甲狀腺激素受體(TSHR)基因內(nèi)含子1區(qū)域單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn)的等位基因頻率和基因型分布情況。②探討TSHR基因內(nèi)含子1區(qū)域基因多態(tài)性與Graves病的相關(guān)性。③探討TSHR基因內(nèi)含子1區(qū)域基因多態(tài)性與Graves病患者性別、年齡、甲狀腺腫大程度、Graves病眼病分級及血清甲狀腺激素水平(FT3、FT4、TSH)、促甲狀腺激素受體抗體(TRAb)水平等臨床資料的相關(guān)性。<

2、br>　　 方法：選取2007年至2009年于山東省臨沂市人民醫(yī)院內(nèi)分泌科就診的Graves病患者1759例為病例組，均符合2008年《中國甲狀腺疾病診治指南》中關(guān)于Graves病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中GWAS階段718例，驗(yàn)證階段1041例；對照組為同期同一地區(qū)、無血緣關(guān)系、性別匹配、年齡≥40歲(以排除遲發(fā)型自身免疫疾病)的健康體檢者(均經(jīng)測定外周血甲狀腺激素水平及TPOAb水平以排除甲狀腺疾病)共1740例(GWAS階段739例，驗(yàn)證

3、階段1001例)。研究對象于清晨空腹采集外周血，分離提取DNA，對14號染色體上TSHR基因內(nèi)含子1區(qū)域進(jìn)行全基因組關(guān)聯(lián)研究(GWAS)，通過TaqMan探針技術(shù)分析基因型，并進(jìn)行一系列連鎖分析、回歸分析和相關(guān)性分析；同時檢測Graves病患者的血清甲狀腺激素水平(FT3、FT4、TSH)和TRAb水平，比較二者及患者性別、年齡、甲狀腺腫大程度、Graves病眼病分級等臨床資料與基因多態(tài)性的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：⑴TSHR基因內(nèi)

4、含子1區(qū)域存在21個SNPs位點(diǎn)，5個SNPs位點(diǎn)進(jìn)入驗(yàn)證階段對718例Graves病患者和739例正常對照者行全基因組關(guān)聯(lián)分析顯示，TSHR基因內(nèi)含子1區(qū)域包含21個SNPs位點(diǎn)，卡方檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其中11個SNPs位點(diǎn)P值達(dá)到GWAS顯著性標(biāo)準(zhǔn)(P<0.01)；對這11個SNPs位點(diǎn)進(jìn)行連鎖分析和回歸分析后，選取5個SNPs位點(diǎn)即rs179247、rs228472、rs12101261、rs2300525、rs17113947為代表進(jìn)入第

5、二階段擴(kuò)大樣本的驗(yàn)證研究。⑵rs12101261是Graves病的一個獨(dú)立致病位點(diǎn)。驗(yàn)證階段和合并統(tǒng)計階段的相關(guān)性分析顯示rs12101261是5個SNPs位點(diǎn)中顯著性最強(qiáng)者(P驗(yàn)證=1.76×10-4，OR驗(yàn)證=0.772，P合并=4.85×10-6，OR合并=0.7906)；進(jìn)一步以logistic回歸分析篩選Graves病的主效易感位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)rs12101261對所有模型的影響最大(P=1.61×10-3)，提示此位點(diǎn)是Grave

6、s病的獨(dú)立致病位點(diǎn)。⑶rs12101261多態(tài)性與臨床資料的相關(guān)性。rs12101261存在TT、TC、CC三種基因型，TT基因型在Graves病組頻率為49.8％，明顯高于正常對照組的41.95％(P=2.53×10-3)，CC基因型在Graves病組頻率為9.15％，低于正常對照組的11.21％(P=0.029)；以治療1年以后血清TRAb1.5U/L為界，將Graves病組分為TRAb陽性和陰性兩個亞組，統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)TT、TC、CC三

7、種基因型在兩組中構(gòu)成比的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.014)，且rs12101261＿T僅與TRAb陽性Graves病患者顯著相關(guān)(P=4.14×10-6，OR=1.317，95％CI：1.171-1.481)，而與TRAb陰性者無明顯相關(guān)性(P=0.524，OR=1.056，95％CI：0.892-1.251)；其他臨床資料如患者性別、年齡、甲狀腺腫大程度、Graves病眼病分級及血清甲狀腺激素水平(FT3、FT4、TSH)均與rs1

8、2101261基因多態(tài)性無相關(guān)性(P均>0.05)。
　　 結(jié)論：①TSHR基因內(nèi)含子1區(qū)域與中國山東臨沂地區(qū)漢族人群Graves病患病風(fēng)險相關(guān)聯(lián)，該區(qū)域存在一連串P值顯著的SNPs位點(diǎn)，其中多個SNPs位點(diǎn)與Graves病發(fā)病高度相關(guān)。②rs12101261是TSHR基因內(nèi)含子1區(qū)域的主效易感位點(diǎn)，不同基因型在不同TRAb水平患者中的分布存在顯著差異，提示rs12101261可能是TRAb陽性Graves病患者的一個主效易感位