缺氧誘導因子在胃癌細胞能量代謝實驗研究.pdf

1、目的：探討缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）基因沉默對SGC-7901人胃癌細胞增殖、凋亡的影響。
　　方法：
　　1.實驗利用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染介導的siRNA干擾技術，將干擾序列轉(zhuǎn)染人胃癌SGC-7901細胞，設立干擾組、陰性對照組、空載體組及空白對照組。
　　2.用RT-PCR及Western Blot檢測各組HIF-1αmRNA及蛋白的表達，
　　3.MTT比色法觀察 HIF-1α基因沉默后 SGC-7901細

2、胞增殖情況，流式細胞儀(FCM)檢測HIF-1α基因沉默后SGC-7901人胃癌細胞凋亡的影響。
　　結果：缺氧實驗結果顯示:缺氧不同時相HIF-lamRNA表達無明顯變化(P>0.05),但隨缺氧時間延長,HIF-la蛋白表達顯著增加(P<0.01)。干擾組在各時間點對HIF-1αmRNA表達的沉默效率均在80％以上，明顯高于其他3組(P均＜0.05)；此外，與其他三組相比，干擾組HIF-1α蛋白相對表達量明顯降低(P＜0.05

3、)，增殖曲線表明其增殖明顯受抑；凋亡率顯著升高(P＜0.01)。
　　結論：HIF-1α基因在人胃癌組織中高表達，與胃癌的分化、臨床分期、分級、侵襲轉(zhuǎn)移因素相關，說明HIF-1α的信號通路在胃癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲、轉(zhuǎn)移中有重要作用，可以作為胃癌內(nèi)缺氧的標志物和胃癌診斷和判斷預后的基因篩選指標，有利于改善既往的治療策略，給腫瘤病人更合理和個性化的治療。 RNA干擾成功地干涉了HIF-1α調(diào)控的糖酵解通路，抑制胃癌細胞生長和能量代謝，