NDRG2在人甲狀腺腫瘤中的表達(dá)及其對甲狀腺癌細(xì)胞增殖和侵襲的影響.pdf

1、甲狀腺腫瘤是臨床上的常見病和多發(fā)病。雖然甲狀腺惡性腫瘤占人類所有癌的1％左右，但仍是內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見的惡性病變，嚴(yán)重威脅著人類的生命健康。除乳頭狀甲狀腺癌經(jīng)包括手術(shù)切除、內(nèi)分泌治療及放射性核素治療在內(nèi)的臨床綜合治療后，可望獲得較好的預(yù)后外，其他病理類型的甲狀腺惡性腫瘤，預(yù)后仍然較差。而繼續(xù)對甲狀腺腫瘤進(jìn)行深入研究，進(jìn)一步取得對甲狀腺惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制的更深入的認(rèn)識，包括尋找與其密切相關(guān)的新基因，仍顯得十分必要。
　　人N

2、DRG2是我校生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室首先克隆并報道的一個新基因。對其進(jìn)行深入研究結(jié)果表明，其在多種正常組織均有表達(dá)，而在結(jié)腸癌、膠質(zhì)瘤、白血病、淋巴瘤和腮腺癌等10余種腫瘤組織或細(xì)胞系中無表達(dá)或低表達(dá)，是多種腫瘤及相應(yīng)正常組織細(xì)胞的差異表達(dá)基因，因此推測該基因可能和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，被列為一新的抑癌候選基因。并且最近的研究結(jié)果證實，NDRG2的表達(dá)是受到Myc的調(diào)控。
　　NDRG2與人甲狀腺腫瘤的關(guān)系先前并無明確報道。N

3、DRG2在人甲狀腺腫瘤中有無表達(dá)及其表達(dá)模式如何，是首先需要明確的問題。本實驗的第一部分就圍繞著這一問題進(jìn)行展開。我們首先運用組織芯片技術(shù)對NDRG2在人甲狀腺腫瘤中的表達(dá)進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NDRG2在正常甲狀腺組織中呈高表達(dá)，在甲狀腺腺瘤組織中呈弱表達(dá)或中等強度表達(dá)，而在多種病理類型的甲狀腺癌組織中呈不表達(dá)或極低表達(dá)。其次通過收集臨床標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色和western印跡檢測，得到了相似結(jié)果，這就說明NDRG

4、2在蛋白表達(dá)水平上呈差異性表達(dá)。此發(fā)現(xiàn)也鼓勵我們進(jìn)一步對NDRG2在甲狀腺腫瘤中的RNA表達(dá)水平進(jìn)行了檢測，通過RT-PCR、real-timePCR方法對收集來的臨床腫瘤標(biāo)本的檢測，結(jié)果和上述實驗結(jié)果一致。從而證明NDRG2在正常甲狀腺組織及甲狀腺癌組織中是一明顯差異性表達(dá)性基因。
　　為進(jìn)一步了解NDRG2在甲狀腺腫瘤發(fā)生、發(fā)展中所起的作用。我們運用NDRG2的過表達(dá)腺病毒載體，感染甲狀腺濾泡狀癌細(xì)胞株FTC-133從而實現(xiàn)N

5、DRG2的過表達(dá)，通過RT-PCR和Western-blot檢測感染成功后，對甲狀腺癌細(xì)胞株進(jìn)行了MTT、平板克隆形成檢測及細(xì)胞周期測定，結(jié)果表明，過表達(dá)NDRG2可以明顯抑制甲狀腺癌細(xì)胞株的增殖。通過Trans-well和細(xì)胞劃痕實驗檢測，結(jié)果顯示，過表達(dá)NDRG2可以明顯抑制甲狀腺癌細(xì)胞株的侵襲能力。
　　我們的實驗結(jié)果證明了NDRG2在正常甲狀腺組織及甲狀腺癌組織中是一差異性表達(dá)性基因，過表達(dá)的NDRG2對甲狀腺癌細(xì)胞株的增