TMPRSS4和onfFN在甲狀腺癌中的表達.pdf

1、目的：通過逆轉錄-聚合酶鏈反應研究TMPRSS4mRNA和onfFNmRNA在甲狀腺癌、甲狀腺良性組織及癌旁組織中的表達情況，分析它們與甲狀腺癌的相關性，不同病理臨床參數(shù)之間的表達差異，進一步通過熒光定量逆轉錄-聚合酶鏈反應檢測兩種分子標記物在良惡性甲狀腺結節(jié)細針吸組織中的表達情況。 方法：收集新鮮無菌手術標本80例，其中包括甲狀腺乳頭狀癌23例，甲狀腺濾泡癌4例，甲狀腺髓樣癌5例，甲狀腺良性病變組織30例，甲狀腺癌旁組織18例

2、。標本收集嚴格按照無菌操作，在手術中收集的標本馬上放入液氮中，迅速冰凍，然后將標本做好標記存入組織庫內，待實驗所需。另外，收集甲狀腺細針吸標本64例，其中術后證實為甲狀腺癌的42例，甲狀腺良性病變的22例，所有病例均經(jīng)過了超聲引導下的細針吸細胞學檢查，其中一部分標本用于涂片后細胞學檢測，另一部分放入裝有TRIzol試劑試管內，然后在-80℃的冰箱內凍存。同時，收集所有患者的資料，將完整的資料存放等待最后分析實驗結果。首先分離提取所有手術

3、組織標本的總RNA，將總RNA利用RT-PCR逆轉錄為cDNA，在PCR反應體系中用特異性TMPRSS4和onfFN引物實現(xiàn)它們的大量擴增，經(jīng)瓊脂糖電泳來分析各組織標本TMPRSS4和onfFN的表達情況。然后，通過熒光定量逆轉錄-聚合酶鏈反定量檢測細針吸甲狀腺結節(jié)組織標本中兩種分子標記物的表達情況。最后，根據(jù)所得數(shù)據(jù)分析兩種分子標記物與甲狀腺癌的關系及其不同臨床病例參數(shù)之間的差異。 結果：TMPRSS4mRNA在甲狀腺癌組織中

4、的表達與甲狀腺良性病變組織中的表達差異有統(tǒng)計學意義(p=0.000)，與甲狀腺癌旁組織中的表達差異也具有統(tǒng)計學意義(p=0.000)，在甲狀腺良性病變組織和癌旁組織中的表達差異無統(tǒng)計學意義(p=1.000)。onfFNmRNA在甲狀腺癌中的表達與甲狀腺良性病變組織中表達差異具有統(tǒng)計學意義(p=0.000)，與甲狀腺癌旁組織中的表達差異也具有統(tǒng)計學意義(p=0.001)，而甲狀腺良性病變組織和癌旁組織中表達差異無統(tǒng)計學意義(p=1.000

5、)。TMPRSS4mRNA和onfFNmRNA在甲狀腺癌中的表達呈正相關(r=0.413，p=0.019)。在不同的臨床病理參數(shù)之間，TMPRSS4mRNA的表達在性別、年齡、腫瘤大小和不同病理類型的甲狀腺癌組織中差異無統(tǒng)計學意義(p=0.703，p=0.472，p=1.000，p=0.315)。在上述參數(shù)中onfFNmRNA的表達也無統(tǒng)計學意義(p=0.637，p=0.0.161，p=0.138，p=0.207)。在有無淋巴結轉移和不

6、同TNM分期的組織中TMPRSS4mRNA的表達差異具有統(tǒng)計學意義(分別p=0.003和p=0.008)，onfFNmRNA的表達同樣具有統(tǒng)計學差異(分別17=0.015和p=0.05)。定量結果表明，可以通過熒光定量RT-PCR可以檢測到細針吸組織中的微量mRNA的表達，t檢驗分析顯示TMPRSS4和onfFNmRNA在惡性組織中的表達要高于良性組織中(分別t=6.301和7.570，均p=0.000)，受試者工作曲線(ROC)分析后

7、得到兩分子標志物的曲線下面積分別為0.939和0.909(均p=0.000)，敏感性和特異性分別為92.9％、72.7％和88.1％、77.3％。 結論：在甲狀腺癌病變組織中TMPRSS4mRNA和onfFNmRNA的表達顯著高于甲狀腺良性病變組織和甲狀腺癌旁組織，熒光定量RT-PCR可以檢測到甲狀腺結節(jié)細針吸組織標本中mRNA的表達，因此可以通過檢測兩種分子標記物的表達聯(lián)合細針吸細胞學檢查，從而提高甲狀腺癌的術前診斷和鑒別診斷