Ndrg2在胰島β細胞中的表達及其功能的初步研究.pdf

1、目的：
　　NDRG2與NDRG1,NDRG3和NDRG4共同組成NDRG家族，該家族成員可能與細胞增殖和分化相關，但其具體的生物學功能有待于進一步研究。人NDRG2為本研究小組首先發(fā)現(xiàn)并報道，其與小鼠NDRG2同源性高達95％。我們前期研究發(fā)現(xiàn)NDRG2在胰腺的表達主要局限在胰島，陸續(xù)有文獻報道Ndrg2作為蛋白激酶Akt的底物參與胰島素信號通路，通過生物信息學分析發(fā)現(xiàn)在NDRG2啟動子上游調控區(qū)存在胰島特異性轉錄因子Pax6與

2、INSM1的結合位點。因此，進一步明確Ndrg2在胰腺中的定位和功能，可以對該基因在體內的生物學功能進行有益的補充和擴展。
　　方法：
　?、偻ㄟ^免疫組織化學和間接免疫熒光的方法明確Ndrg2在胰內分泌細胞的分布與定位;②收集臨床病理標本，觀察在胰腺疾病患者與正常人胰腺中的表達與分布;③在胰內分泌細胞中改變Ndrg2的表達，觀察對該細胞生物學功能的影響;④在高濃度葡萄糖和游離脂肪酸慢性刺激條件下，觀察對胰內分泌細胞功能和信號

3、轉導通路的影響
　　結果：
　?、貼drg2陽性反應物主要表達在胰腺的胰島，且主要表達在分泌胰島素的細胞，而在分泌胰高血糖素、生長抑素和胰多肽的細胞幾乎不表達。②在收集的臨床胰腺疾病患者的病理標本中，Ndrg2陽性反應物主要定位在胰島，與胰島素的陽性反應物分布與定位相似。胰島細胞增生癥患者胰島數(shù)量增加，體積增大，且該疾病患者胰腺中Ndrg2表達增加。③胰島β細胞βTC3中，Ndrg2過表達，胰島素mRNA和蛋白質水平下降。相

4、對對照組，NDRG2siRNA轉染組胰島素含量略高。④當?shù)鞍准っ窤kt持續(xù)活化時，Ndrg2磷酸化水平增加。高濃度葡萄糖和游離脂肪酸削弱βTC3細胞GSIS功能。高糖條件下，βTC3細胞中Akt磷酸化水平減弱。高脂肪酸條件下，βTC3細胞中PTEN增強，Akt與Ndrg2磷酸化水平減弱。
　　結論：
　?、貼drg2主要表達在胰島β細胞。在小鼠各細胞系中，胰島β細胞系βTC3中Ndrg2表達較高，提示Ndrg2在胰島β細胞中

5、發(fā)揮著重要的生物學功能。②在收集的臨床胰腺疾病患者的病理標本中，Ndrg2分布和定位與胰島素相似，提示Ndrg2與胰島素之間存在一定的相關性。由于胰島細胞增生癥患者胰島β細胞增生，Ndrg2表達增加。③胰島β細胞βTC3中，Ndrg2表達與胰島素存在負相關，推測Ndrg2可能參與胰島素基因的轉錄調控。④Ndrg2是蛋白激酶Akt的底物。高濃度葡萄糖和游離脂肪酸對βTC3細胞產(chǎn)生糖毒性和脂毒性。該過程中PTEN-Akt-Ndrg2信號轉導