MHC-Ⅰ、CD8和CD4分子的表達檢測在特發(fā)性炎癥性肌病診斷和鑒別診斷中的應用價值探討.pdf

1、目的：(1)比較特發(fā)性炎癥性肌病(idiopathic inflammatory myopathies，IIMs)各亞組的臨床和病理資料，明確其各自不同的臨床、組織學和免疫病理特征；(2)采用免疫酶組織化學染色和免疫熒光組織化學染色檢測CD4、CD8和MHC-1分子在特發(fā)性炎癥性肌病中的表達；(3)分析MHC-I分子在不同類別神經肌肉疾病肌活檢標本中的表達以探討CD8/MHC-I分子復合物在IIMs診斷和鑒別診斷中的應用價值。

2、方法：本研究對57例肌肉活檢標本進行回顧性研究。病例來源為2004年9月至2007年8月期間在齊魯醫(yī)院神經肌肉病研究所進行肌肉活檢的57例病人，包括41例符合Bohan和：Peter<'[1]>提出的IIMs診斷標準的病例，其中PM 23例、DM 15例和IBM 3例，余下16例為光鏡下明確伴有炎癥浸潤其他神經肌肉疾病，其中包括5例面肩肱型肌營養(yǎng)不良(FSHMD)、5例dysferlinopathies和3例Duchenne型肌營養(yǎng)不良

3、(均經分子免疫病理證實)、2例脂質沉積伴鑲邊空泡病例、1例伴鑲邊空泡的遠端肌病(distal myopathy with rimmed vacuole，DMRV)。同時選取10例臨床上有肌無力癥狀但肌活檢病理正常，最終證實為其他系統(tǒng)疾病而非神經肌肉病的病例作為正常對照。采用免疫酶組織化學染色和免疫熒光組織化學染色檢測CD4、CD8和MHC-I分子在炎癥性肌病中的表達，同時應用免疫熒光雙染以檢測CD8/MHC-I分子復合物在特發(fā)性炎癥性肌

4、病中的表達。 結果： 1.MHC-I、CD8和CD4免疫酶組織化學染色結果 10例正常對照和16例伴炎癥浸潤的其他神經肌肉病肌纖維均不表達MHC-Ⅰ分子。而IIMs中，DM病例MHC-Ⅰ表達陽性率為100％，PM和IBM的陽性率分別為86.9％和66.7％。所有IIMs病例包括DM、PM和IBM其MHC-Ⅰ的陽性表達均表現為肌膜處彌漫性表達，DM病例尚可見到肌束周圍陽性表達程度增強，呈強陽性(棕褐色)。CD4和C

5、D8免疫酶組織化學染色結果顯示：DM中浸潤的炎細胞以CD4<'+>T細胞為主，而PM和IBM則以CD8<'+>T細胞浸潤為主，并且可見到CD8<'+>T細胞侵入非壞死肌纖維內。伴有炎癥浸潤的其他16例肌活檢標本，如dysferlinopathies，其浸潤的炎細胞則主要以CD4<'+>T細胞為主。 2.MHC-Ⅰ和CD8免疫熒光染色結果 (1)MHC-Ⅰ免疫熒光染色顯示：DM表現為肌膜、肌間質內浸潤的炎細胞及血管內皮細胞

6、呈彌漫性MHC-Ⅰ表達，呈現明亮紅色熒光(++)，同正常對照相比，可見到肌內膜毛細血管密度明顯減少；PM和IBM均表現為肌膜、肌內膜內浸潤的炎細胞及毛細血管內皮細胞處彌漫性MHC-Ⅰ表達，分別呈現閃亮(+++)和明亮(++)紅色熒光。 (2)CD8免疫熒光染色顯示：DM表現為肌間質內(肌束膜)血管周圍可見CD8陽性T細胞浸潤，而PM和IBM則表現為肌內膜內肌纖維周圍大量CD8陽性T細胞浸潤。 3.CD8和MHC-Ⅰ免疫熒

7、光雙染結果 我們采用CD8和MHC-Ⅰ免疫熒光雙染方法確定CD8/MHC-Ⅰ分子復合物的存在，具體結果為15例DM病例中均未見到CD8/MHC-Ⅰ分子復合物的存在，23例PM病例有15例可見到CD8/MHC-Ⅰ分子復合物的存在，陽性率65.2％，3例IBM病例中僅有1例CD8/MHC-Ⅰ分子復合物的存在，陽性率33.3％。而伴炎癥浸潤的其他神經肌肉病和正常對照均未顯示CD8/MHC-Ⅰ分子復合物的存在。 結論：

8、1.我們的研究表明MHC-Ⅰ分子的表達檢測在特發(fā)性炎癥性肌病的診斷和鑒別診斷中具有重要價值。MHC-Ⅰ在DM中表達敏感性較好，表達陽性率為100％，但在PM中陽性率略低，這一方面表明MHC-Ⅰ表達陰性并不能否定PM的診斷可能性，從另一方面也說明了Bohan和Peter提出的診斷標準所界定的PM病例中可能包含有一些MHC-Ⅰ表達陰性的其他神經肌肉病病例。因為MHC-Ⅰ在正常肌纖維和其他神經肌肉病中均未見到其陽性表達，因此，采用免疫組化方法

9、檢測MHC-Ⅰ的表達應該作為常規(guī)評估IIMs的一個方面，特別是在診斷不確定的情況下，有利于鑒別那些病理形態(tài)上與IIMs相像的伴炎癥浸潤的其他神經肌肉疾病。同時檢測CD4<'+>T/CD8<'+>T細胞比率則有助于更好的將3類IIMs相鑒別開來，PM和IBM中炎細胞浸潤以CD8<'+>T為主，而DM則以CD4<'+>T細胞浸潤為主。 2.雖然CD8/MttC-Ⅰ分子復合物(即CD8+T細胞侵入MHC-Ⅰ表達陽性的非壞死肌纖維)被認