不同情況下大鼠腦組織中MHC、CD4及CD8分子表達的變化及意義.pdf

1、第一部分不同年齡大鼠腦組織中MHC、CD4及CD8分子的表達及其意義 目的：觀察不同年齡大鼠腦組織中MHCI、MHCII、CD4及CD8分子的表達，并探討其意義。 方法：將實驗大鼠按胎齡和日齡分為7組：E15d、E19d、POd、PTd、P14d、P28d及老年組(24月齡)，每組6只，共42只大鼠。經灌流取材冰凍切片，選取頂葉大腦皮質、海馬、黑質、紋狀體、小腦及脈絡叢等部位，采用免疫組化染色方法，檢測MHCI、MHCI

2、I、CD4和CD8分子在上述部位的表達情況。 結果：(1)E15d大鼠腦組織未見MHCI類分子的表達；其他年齡組在結締組織和脈絡叢有MHCI類分子的表達。其中從P0～P14d組海馬和頂葉大腦皮質神經元上MHCI類分子的表達隨著日齡的增加而逐漸升高，P14d組的表達最高(P<0.05)；P28d組的表達明顯下降(P<0.05)：老年組大鼠海馬神經元上的表達再次升高(P<0.05)。(2)E15d組大鼠腦組織中未見MHCII、CD4

3、和CD8分子的表達；其他年齡組MHCII、CD4和CD8除在結締組織和脈絡叢表達外，在神經元上未見表達。(3)各年齡組在小腦皮質神經元、黑質、紋狀體等區(qū)域未見MHCI、MHCII、CD4和CD8分子的表達。 結論： (1)胚胎后期腦內開始有MHC、CD4和CD8分子的表達，表明此時腦內已有可能出現(xiàn)免疫反應； (2)在新生鼠及出生早期，部分皮質和海馬神經元上有MHCI類分子的表達，可能與調節(jié)神經元活動和突觸可塑性連接有關； (3)

4、老年組大鼠MHCI類分子在海馬神經元上的表達升高，可能與神經元的功能衰退和記憶識別能力下降有關。 第二部分帕金森病大鼠及NSCs聯(lián)合GDNF移植后腦組織中MHC、CD4及CD8分子的表達變化 目的：觀察帕金森病(PD)模型大鼠黑質區(qū)MHCI、CD4和CD8免疫分子的表達變化和NSCs聯(lián)合GDNF移植后移植區(qū)及免疫反應情況并探討其意義。 方法： (1)將成功PD模型大鼠按時程分為3組：7d、14d、30d，每組4只

5、，共12只；正常對照組4只。經灌流取材冰凍切片，選取黑質區(qū)，采用免疫組化染色方法，檢測MHCI、CD4和CD8分子表達情況。(2)取E14.5d大鼠腹側中腦(VM)組織進行原代培養(yǎng)，經鑒定為具有增殖分化能力的神經干細胞(NSCs)后，制備成細胞懸液，加入GDNF，借助腦立體定位儀移植到PD模型大鼠的紋狀體內。按照移植的時間點分為3組：2w、4w、6w，經行為學檢測后分批處死，每組4只，共12只；假手術對照組4只。經灌流取材冰凍切片，選取

6、移植針道區(qū)及周圍區(qū)域，采用免疫組化染色方法，檢測MHCII、CD4和CD8分子表達情況。 結果：(1)PD模型大鼠組，MHCI、CD4和CD8陽性細胞在黑質區(qū)可見表達，與7d組比較，14d和30d組這三種陽性細胞的表達量升高(P<0.05)，其中30d組最高(P<0.05)；紋狀體區(qū)未見表達；對照組在各時間點均未見上述三種陽性細胞。(2)NSCs聯(lián)合GDNF組，移植區(qū)及周圍區(qū)域；MHCII、CD4和CD8陽性細胞在2w組大量出現(xiàn)

7、，4w組下降(P<0.05)，6w組基本消失(P<0.05)；假手術對照組在各時間點均未見陽性細胞。 結論：PD模型大鼠損毀側黑質區(qū)存在MHCI、CD4和CD8陽性細胞，可能是由于該側多巴胺(DA)能神經元受到損害，引起周圍的小膠質細胞等激活表達MHCl分子，同時出現(xiàn)T淋巴細胞滲透進入黑質區(qū)，因為這三種陽性細胞的表達變化與同時期DA能神經元喪失程度呈正相關。NSCs聯(lián)合GDNF移植組在2w、4w組仍然出現(xiàn)MHCII、CD4和CD