mTOR抑制劑對CD4和CD8 T淋巴細胞免疫功能的影響.pdf

1、目的：通過體外實驗明確mTOR-I對CD4及CD8 T細胞細胞因子IL-2及INF-γ分泌功能的影響。從而探討mTOR-I對T淋巴細胞亞型(CD4及CD8 T細胞)免疫功能的影響。并了解其免疫抑制功能與環(huán)孢素A相比是否有差異。
　　方法：提取小鼠脾臟并分離淋巴細胞，通過流式細胞分選技術(shù)分離出CD4和CD8 T細胞，單獨培養(yǎng)。按對照組、環(huán)孢素A組以及mTOR-I雷帕霉素(Rapa)組分組，共培養(yǎng)48小時。通過實時熒光定量RT-PCR

2、法檢測各組IL-2及INF-γ mRNA的表達。
　　結(jié)果：提取的小鼠脾臟淋巴細胞經(jīng)流式細胞儀分選，其中CD4 T細胞占細胞總數(shù)12.1％，CD8T細胞占細胞總數(shù)5.7％。共培養(yǎng)48小時后行Real-time PCR示：CD4T細胞中Rapa處理組IL-2 mRNA相對表達量為對照組的65.0％，CsA處理組IL-2 mRNA相對表達量為對照組的62.0％；CD8細胞中Rapa處理組IL-2 mRNA相對表達量為對照組的40.5％

3、，CsA處理組IL-2 mRNA相對表達量為對照組的42.7％。CD4T細胞中Rapa處理組INF-γ mRNA相對表達量為對照組的66.3％，CsA處理組INF-γ mRNA相對表達量為對照組的52.2％；CD8細胞中Rapa處理組INF-γ mRNA相對表達量為對照組的49.5％，CsA處理組INF-γ mRNA相對表達量為對照組的42.4％，各組間運用獨立樣本t檢驗，P<0.05。CD4及CD8 Rapa和CsA組IL-2、INF