羊膜和可吸收縫線在小梁切除術(shù)中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：青光眼是一種常見(jiàn)的致盲眼病，濾過(guò)手術(shù)是藥物、激光治療無(wú)法控制的主要治療手段，目前治療青光眼的新技術(shù)、新方法不斷出現(xiàn)，但小梁切除術(shù)仍是濾過(guò)手術(shù)中治療青光眼的主要術(shù)式。術(shù)后失敗率較高，主要原因是手術(shù)區(qū)成纖維細(xì)胞(fibroblast,Fb)增殖，瘢痕形成以致影響遠(yuǎn)期手術(shù)療效。 小梁切除聯(lián)合應(yīng)用絲裂霉素C(Mitomycin C，MMC)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)等調(diào)節(jié)傷口愈合的藥物學(xué)調(diào)節(jié)技術(shù)，對(duì)減

2、少瘢痕的形成有很好效果，但同時(shí)會(huì)產(chǎn)生較多副作用。伴隨近年來(lái)材料科學(xué)和分子生物學(xué)迅速發(fā)展，建立現(xiàn)代改良的標(biāo)準(zhǔn)小梁切除術(shù)并結(jié)合非藥物調(diào)節(jié)技術(shù)減少手術(shù)失敗率成了青光眼濾過(guò)性手術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)。 羊膜(amniotic membrane,AM)具有抗原性低、促進(jìn)眼表上皮化、抑制纖維組織增生和新生血管形成等作用。Coatedvicryl(polyglactin 910)suture(PGIA)，是由90％的丙交酯(lactide，LA)和10

3、％的L-乙交酯(glycolide，GA)人工合成的多聚合成縫線，通過(guò)水解作用降解而吸收，有良好的組織相容性。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)小梁切除術(shù)聯(lián)合生物羊膜與可吸收縫線，并與單純的小梁切除術(shù)進(jìn)行對(duì)照，以觀察兩種植入物在小梁切除術(shù)中減少瘢痕形成的作用及手術(shù)的安全性與有效性，為提高青光眼手術(shù)成功率尋找理想的方法。 方法： 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組將30只健康大白兔隨機(jī)分三組：對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組；每組10只兔20眼，對(duì)照組行單純

4、的小梁切除術(shù)操作，實(shí)驗(yàn)1組鞏膜瓣下聯(lián)合羊膜移植術(shù)(amniotic membrane transplantation，AMT)，實(shí)驗(yàn)2組鞏膜瓣下聯(lián)合PGLA植入。 2、術(shù)后第1W內(nèi)及術(shù)后第2W、3W、6W、10W在裂隙燈下觀察結(jié)膜傷口愈合情況，結(jié)膜充血程度，濾過(guò)泡形態(tài)，濾過(guò)道通暢性，角膜透明度，前房反應(yīng)及晶體透明度。 3、測(cè)量眼壓于術(shù)前及術(shù)后第1W、2W、3W、6W、10W各組均用Shiotz眼壓計(jì)測(cè)量，比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照

5、組在各時(shí)間點(diǎn)的眼壓有無(wú)差異。 4、組織病理學(xué)于術(shù)后第1W、2W、3W、6W、10W各組均隨機(jī)取2只兔，摘除眼球，將手術(shù)部位固定，制成石蠟切片，做HE染色，光鏡下觀察濾過(guò)道開(kāi)放、炎癥反應(yīng)和異物反應(yīng)情況；經(jīng)Masson三色染色，觀察濾過(guò)道新生膠原纖維生成情況；做增殖細(xì)胞核抗原(proliferative cell nucleus antigen PCNA)染色，運(yùn)用顯微圖像分析系統(tǒng)對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行免疫組化評(píng)分，做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

6、結(jié)果： 1、三組術(shù)后球結(jié)膜愈合好，前房反應(yīng)3d內(nèi)均消失，均未出現(xiàn)角膜水腫、淺前房、滲出、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜脫離等并發(fā)癥，三組各有2例前房出血，對(duì)照組出現(xiàn)1例濾過(guò)泡滲漏。 2、兩實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組結(jié)膜充血時(shí)間長(zhǎng)，且同時(shí)間點(diǎn)比較較重，實(shí)驗(yàn)1組比實(shí)驗(yàn)2組充血重，比較均有顯著性差異(P<0.05)。對(duì)照組術(shù)后2W充血消失，兩實(shí)驗(yàn)組術(shù)后3W消失。 3.濾過(guò)泡術(shù)后第1W三組除對(duì)照組1眼外均為Ⅱ級(jí)功能性濾過(guò)泡；實(shí)驗(yàn)1組和實(shí)驗(yàn)2組均較對(duì)照

7、組功能性濾過(guò)泡比率高，實(shí)驗(yàn)1組較實(shí)驗(yàn)2組功能性濾過(guò)泡比率高。 4、眼壓變化三組之間術(shù)前和術(shù)后第1W眼壓值均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；2W以后各時(shí)間點(diǎn)，對(duì)照組眼壓較實(shí)驗(yàn)組眼壓高，各時(shí)間點(diǎn)比較均有顯著性差異(P＜0.05)；但在各時(shí)間點(diǎn)，兩實(shí)驗(yàn)組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。 5、濾過(guò)道開(kāi)放比率的比較各組濾過(guò)道開(kāi)放比率和病理組織學(xué)HE染色所得結(jié)果基本一致。 6、組織學(xué)觀察 6.1 HE染色：術(shù)后早期三

8、組濾過(guò)區(qū)均可見(jiàn)較多的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。對(duì)照組淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞較多，實(shí)驗(yàn)1組以淋巴細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞為多，還有中性粒細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)2組可見(jiàn)中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。術(shù)后第1W三組濾過(guò)道均開(kāi)放，術(shù)后第2W、3W、6W和10W，實(shí)驗(yàn)組濾過(guò)道開(kāi)放比率較對(duì)照組高，實(shí)驗(yàn)1組較2組高。 6.2 Masson三色染色：術(shù)后第1W三組均無(wú)膠原產(chǎn)生；術(shù)后第2W，對(duì)照組有粗大致密的膠原產(chǎn)生，實(shí)驗(yàn)2組有松散的膠原產(chǎn)生；實(shí)驗(yàn)1組術(shù)后3W僅少量膠原產(chǎn)生。

9、 6.3 免疫組織化學(xué)染色：術(shù)后觀察各時(shí)間點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組PCNA表達(dá)均和對(duì)照組比較，前兩者PCNA表達(dá)較弱，比較均有顯著性差異(P＜0.05)；同時(shí)間點(diǎn)比較，實(shí)驗(yàn)1組與實(shí)驗(yàn)2組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；術(shù)后2W以后，實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組PCNA表達(dá)無(wú)明顯變化，趨于穩(wěn)定，未見(jiàn)Fb明顯增生。 結(jié)論： 1、兔眼小梁切除聯(lián)合AMT可以抑制Fb的增殖，減少瘢痕形成，較長(zhǎng)時(shí)間的維持功能性濾過(guò)泡。 2、兔眼小梁