組織工程化可吸收縫線的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:制備含有重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(Recombinant Humanbone morphogenetic Protein，BMP-2)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor, rhVEGF)兩種因子的殼聚糖(chitosan，CTS)納米粒，將納米粒復(fù)合于可吸收縫線（polydioxanone synthetic absorbable sutur

2、e,PDSⅡ）上，研究其體外釋放效果，為進(jìn)一步研究載藥縫線在體內(nèi)釋放效果等實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。
　　方法:1.采用離子交聯(lián)法，在rhBMP-2濃度為50ng/ml，rhVEGF濃度為10ng/ml，CTS濃度為1mg/ml，TPP濃度為1.5mg/ml，CTS/TPP質(zhì)量比為5∶1的最優(yōu)工藝條件下，制備載有rhBMP-2及VEGF的殼聚糖納米粒，通過(guò)粒徑測(cè)定儀測(cè)定其粒徑大小及zeta電位，觀察納米粒形態(tài)，利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzym

3、e-linked immunosorbentassay，ELISA)測(cè)定載藥殼聚糖納米粒的包封率。2.采用混合法，以聚已內(nèi)酯為PDSⅡ膜改性及復(fù)合試劑，以二氯甲烷為溶劑，通過(guò)混合后將rhBMP-2-rhVEGF殼聚糖納米粒復(fù)合于PDSⅡ上。3.采用體外恒溫震蕩法，對(duì)復(fù)合有載藥納米粒的PDSⅡ進(jìn)行體外緩釋實(shí)驗(yàn)，利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)測(cè)定1、2、4、6、10、1

4、4、18、22、26天每個(gè)時(shí)間段所釋放的藥物濃度及藥量。
　　結(jié)果:1.所制備的rhBMP-2-rhVEGF殼聚糖納米粒呈球形，粒徑大小平均值為464.6±6.3nm，zeta電位為25.4±1.2mv，rhBMP-2包封率為90.6±1.8％，rhVEGF包封率為92.8±1.4％。2.通過(guò)混合法成功的將載藥殼聚糖納米粒復(fù)合于PDSⅡ上。3.復(fù)合有載藥納米粒的PDSⅡ分別在1、2、4、6、10、14、18、22、26天所釋放的r

5、hBMP-2含量平均值為95.375，179.052，85.037，62.275，63.844，60.324，65.717，76.642，59.631(pg)，rhVEG含量平均值20.682，37.682，17.645,14.828,13.736,12.501,13.214,14.946,12.410(pg)。
　　結(jié)論:1.利用聚已內(nèi)酯可以將載藥殼聚糖納米粒復(fù)合于PDSⅡ上。2.通過(guò)本實(shí)驗(yàn)制備出的復(fù)合載藥殼聚糖納米粒的PDSⅡ