錯配修復基因hMSH6、hMSH2與子宮內(nèi)膜異位癥相關性的研究.pdf

1、子宮內(nèi)膜異位癥(endometiosis，E MS)是一種常見婦科疾病，在育齡期婦女中的發(fā)病率逐年增高達10％-15％，目前原因尚未明確。繼發(fā)性痛經(jīng)進行性加重是內(nèi)異癥典型癥狀，慢性盆腔痛和痛經(jīng)在患者中發(fā)病率為20％-90％，25％-35％不孕癥患者與此病有關，而本病患者不孕率高達40％，且有性交痛及其他特殊癥狀:侵及腸管致腹痛、腹瀉、便秘及少量便血，嚴重者出現(xiàn)腸梗阻癥狀;侵及膀胱可出現(xiàn)尿頻、尿痛等膀胱刺激癥狀;侵及輸尿管則可出現(xiàn)腰痛、血

2、尿等癥狀;侵及剖宮產(chǎn)或會陰側切口瘢痕，則可出現(xiàn)瘢痕深部捫及劇痛包塊;本病雖為良性疾病，但其細胞表現(xiàn)的增生、浸潤、轉移等極具侵襲性的特性及復發(fā)率極高的臨床特點均提示了其具有惡性腫瘤的生物學行為，且已經(jīng)研究證實了二者的相似性，臨床上腹腔鏡是治療子宮內(nèi)膜異位癥的金標準，術后輔助藥物治療是治療內(nèi)異癥的常用方法，但治療效果不滿意，容易復發(fā)，其發(fā)病不但給育齡期婦女的生殖健康和身心健康造成嚴重影響，而且嚴重影響患者生活質(zhì)量。其發(fā)生機制目前尚不清楚。<

3、br>　　近年來隨著對多種惡性腫瘤的深入研究，多基因突變是腫瘤發(fā)生的重要原因之一。而錯配修復(mismatch repair gene; MMR)系統(tǒng)在細胞生長、分化、凋亡及腫瘤轉移、復發(fā)的作用越來越大。錯配修復基因是生物進化過程中細胞衍生出的保守基因，它是人類細胞糾正復制錯誤的重要手段，常出現(xiàn)在細胞增殖過程中，對保持DNA復制的忠實性和基因組的穩(wěn)定性起到關鍵作用。其基因功能是消除DNA復制過程中由于DNA聚合酶滑移而引起的堿基一堿基錯

4、配和插入一缺失突變環(huán)。由于MMR基因的改變，使得細胞在增殖過程中核苷酸的錯誤摻入與缺失不能修復，表現(xiàn)為整個基因組不穩(wěn)定，隨機突變率增高，導致一系列靶基因如涉及細胞生長、分化、凋亡及腫瘤轉移等的相關基因改變，從而導致腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。目前已發(fā)現(xiàn)的人類錯配修復基因共9個，包括來自Muts家族的hMSH2、hMSH3、hMSH4、hMSH5和hMSH6及來自MutL家族的hMLH1、hPMS1、hPMS2和最新被鑒定出來的hMLH3.以hML

5、H1和hMSH2的功能最為重要，它們擔負對錯配位點的識別和切除的主要功能，hMSH6能與hMSH2形成hMutS-α，識別錯配，保證微衛(wèi)星穩(wěn)定性。目前，國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，h MSH6表達異常在食管癌、慢性粒細胞白血病、直腸癌、部分散在性結直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、胃癌、卵巢癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生過程中起重要作用。hMSH2表達見于消化道腫瘤。國內(nèi)已有hMLH1與子宮內(nèi)膜異位癥關系的研究，從蛋白質(zhì)水平顯示:與正常子宮內(nèi)膜組織相比，異位內(nèi)膜

6、組織中hMLH1的表達呈下調(diào)趨勢。未見hMSH2、hMSH6與子宮內(nèi)膜異位癥關系的研究。錯配修復蛋白hMSH2、hMLH1是完成錯配修復反應的關鍵蛋白，正常情況下它們均在細胞漿合成，被轉運到細胞核后，參與完成錯配修復反應。因此，在細胞漿、細胞核均可見hMSH2、hMLH1的表達，而且其表達量或在細胞內(nèi)表達位置的改變都會影響錯配修復功能。hMSH6基因是人類錯配修復系統(tǒng)的主要成員之一。基因突變導致錯配修復基因突變增加，從而微衛(wèi)星不穩(wěn)定(M

7、utationMicro satelliteinstabilityh)因素增加。本研究試圖對錯配修復基因hMSH6、hMSH2與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機制及病因的相關性做進一步研究。
　　目的：
　　1.觀察錯配修復基因(mismatch repair, MMR)h MSH6在子宮異位內(nèi)膜正常子宮內(nèi)膜的表達，進而探討h MSH6在內(nèi)異癥發(fā)生、發(fā)展中的作用及臨床意義。
　　2.觀察錯配修復基因(mismatch repair

8、, MMR)h MSH2在子宮異位內(nèi)膜、正常子宮內(nèi)膜的表達，進而探討h MSH2在內(nèi)異癥發(fā)生、發(fā)展中的作用及臨床意義。
　　方法：
　　1.選擇南開醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年9月至2013年9月經(jīng)腹腔鏡治療且病理診斷為卵巢子宮內(nèi)膜異位癥患者22例，所有患者術前未經(jīng)藥物治療，采集異位內(nèi)膜組織;18例經(jīng)腹腔鏡治療且病理診斷為子宮肌瘤的患者，采集正常子宮內(nèi)膜組織。病理證實或臨床懷疑合并惡性腫瘤以及檢查前3個月接受激素等藥物治療的患者排除

9、在本研究外。采用免疫組織化學SP法檢測22例子宮內(nèi)膜異位癥組織和18例正常子宮內(nèi)膜中hMSH6的表達。
　　2.選擇南開醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年9月至2013年9月經(jīng)腹腔鏡治療且病理診斷為卵巢子宮內(nèi)膜異位癥患者22例，隨機分組，所有患者術前未經(jīng)藥物治療，采集異位內(nèi)膜組織;18例經(jīng)腹腔鏡治療且病理診斷為子宮肌瘤的患者，采集正常子宮內(nèi)膜組織。病理證實或臨床懷疑合并惡性腫瘤以及檢查前3個月接受激素等藥物治療的患者排除在本研究外。采用免疫組織

10、化學SP法檢測22例子宮內(nèi)膜異位癥組織和18例正常子宮內(nèi)膜中hMSH2的表達。
　　結果：
　　1.內(nèi)異癥組h MSH6蛋白表達陽性率為68.2.％(15/22)，正常內(nèi)膜組hMSH6蛋白表達陽性率為33.3.0％(6/18)，內(nèi)膜異位癥組h MSH6基因蛋白表達增強，明顯高于正常內(nèi)膜組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。(P=0.028，x2=4.821)
　　2.內(nèi)異癥組h MSH2蛋白表達陽性率為54.5％(12

11、/22)，正常內(nèi)膜組h MSH2蛋白表達陽性率為44.0％(8/18)，內(nèi)膜異位癥組h MSH2基因蛋白表達增強，略高于正常內(nèi)膜組，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。(P=0.525，x2=0.404)
　　結論：
　　1.錯配修復基因h MSH6的蛋白在觀察組（內(nèi)膜異位癥組）的高表達，明顯高于對照組（正常內(nèi)膜組），提示錯配修復基因h MSH6在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的病因中可能發(fā)揮一定作用，為進一步研究子宮內(nèi)膜異位癥提供了新的