除蟲菊素和雷公藤紅素的生物合成研究.pdf

1、除蟲菊是有著較好殺蟲活性并不易產(chǎn)生抗藥性的殺蟲植物，其中的有效成分除蟲菊素主要由除蟲菊的花中提取，故產(chǎn)量受自然條件影響較大，通過組織培養(yǎng)方式生產(chǎn)除蟲菊素具有很好的應用價值。本試驗利用根癌農(nóng)桿菌LBA4404和C58對除蟲菊無菌苗和愈傷組織進行誘導，形成不定根和冠癭組織，利用真菌誘導子對除蟲菊發(fā)狀根進行處理，以期得到高產(chǎn)的除蟲菊素生產(chǎn)體系;利用雷公藤不定根生產(chǎn)雷公藤紅素，探討H培養(yǎng)基中大量元素濃度對雷公藤紅素合成的影響。主要取得以下結(jié)果:

2、
　　1、除蟲菊不定根可以通過不含冠癭組織轉(zhuǎn)化基因的根癌農(nóng)桿菌LBA4404誘導獲得，其生活力較好，可以在固體培養(yǎng)基以及液體培養(yǎng)基中生長，并且沒有退化的跡象。其中沒能檢測到除蟲菊素，卻可以檢測到治療阿爾茲海默病的特效成分雪花胺，同樣有著工業(yè)化生產(chǎn)的價值。
　　2、利用除蟲菊發(fā)狀根進行雙轉(zhuǎn)化研究時發(fā)現(xiàn)，乙酰丁香酮濃度為100μmol/L時，雙轉(zhuǎn)化誘導率最高為85％，負壓會降低除蟲菊雙轉(zhuǎn)化的誘導率，根癌農(nóng)桿菌C58對發(fā)狀根雙轉(zhuǎn)化

3、的誘導率要高于野生根癌農(nóng)桿菌，超聲處理對雙轉(zhuǎn)化的誘導率沒有影響。利用根癌農(nóng)桿菌C58誘導得到乳白色的除蟲菊冠癭組織細胞，初步建立了除蟲菊冠癭組織懸浮體系。
　　3、利用真菌誘導子對除蟲菊發(fā)狀根進行處理，發(fā)現(xiàn)番茄灰霉病菌、蘋果炭疽菌與小麥根腐菌中提取的真菌誘導子可使發(fā)狀根中的除蟲菊素含量有較明顯的提高，辣椒疫霉病菌中提取的真菌誘導子可以使發(fā)狀根提取物對三齡淡色庫蚊幼蟲的殺蟲活性顯著增強，24h時1mg/mL濃度即可導致其死亡率達到5