除蟲菊素和雷公藤紅素的生物合成研究.pdf

1、除蟲菊是有著較好殺蟲活性并不易產(chǎn)生抗藥性的殺蟲植物，其中的有效成分除蟲菊素主要由除蟲菊的花中提取，故產(chǎn)量受自然條件影響較大，通過(guò)組織培養(yǎng)方式生產(chǎn)除蟲菊素具有很好的應(yīng)用價(jià)值。本試驗(yàn)利用根癌農(nóng)桿菌LBA4404和C58對(duì)除蟲菊無(wú)菌苗和愈傷組織進(jìn)行誘導(dǎo)，形成不定根和冠癭組織，利用真菌誘導(dǎo)子對(duì)除蟲菊發(fā)狀根進(jìn)行處理，以期得到高產(chǎn)的除蟲菊素生產(chǎn)體系;利用雷公藤不定根生產(chǎn)雷公藤紅素，探討H培養(yǎng)基中大量元素濃度對(duì)雷公藤紅素合成的影響。主要取得以下結(jié)果:

2、
　　1、除蟲菊不定根可以通過(guò)不含冠癭組織轉(zhuǎn)化基因的根癌農(nóng)桿菌LBA4404誘導(dǎo)獲得，其生活力較好，可以在固體培養(yǎng)基以及液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，并且沒(méi)有退化的跡象。其中沒(méi)能檢測(cè)到除蟲菊素，卻可以檢測(cè)到治療阿爾茲海默病的特效成分雪花胺，同樣有著工業(yè)化生產(chǎn)的價(jià)值。
　　2、利用除蟲菊發(fā)狀根進(jìn)行雙轉(zhuǎn)化研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，乙酰丁香酮濃度為100μmol/L時(shí)，雙轉(zhuǎn)化誘導(dǎo)率最高為85％，負(fù)壓會(huì)降低除蟲菊雙轉(zhuǎn)化的誘導(dǎo)率，根癌農(nóng)桿菌C58對(duì)發(fā)狀根雙轉(zhuǎn)化

3、的誘導(dǎo)率要高于野生根癌農(nóng)桿菌，超聲處理對(duì)雙轉(zhuǎn)化的誘導(dǎo)率沒(méi)有影響。利用根癌農(nóng)桿菌C58誘導(dǎo)得到乳白色的除蟲菊冠癭組織細(xì)胞，初步建立了除蟲菊冠癭組織懸浮體系。
　　3、利用真菌誘導(dǎo)子對(duì)除蟲菊發(fā)狀根進(jìn)行處理，發(fā)現(xiàn)番茄灰霉病菌、蘋果炭疽菌與小麥根腐菌中提取的真菌誘導(dǎo)子可使發(fā)狀根中的除蟲菊素含量有較明顯的提高，辣椒疫霉病菌中提取的真菌誘導(dǎo)子可以使發(fā)狀根提取物對(duì)三齡淡色庫(kù)蚊幼蟲的殺蟲活性顯著增強(qiáng)，24h時(shí)1mg/mL濃度即可導(dǎo)致其死亡率達(dá)到5