遠端肢體缺血后處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：通過建立大鼠心肌缺血再灌注損傷模型，觀察心電圖變化、檢測血清 CK-MB、CK、LDH濃度變化、觀察心肌組織的形態(tài)及細胞內(nèi)線粒體等超微結構變化，探討遠端肢體缺血后處理對心肌存在的保護作用。
　　方法：選用健康的SD大鼠（雌雄不限、2-3月齡、體重250-350g）來建立心肌缺血再灌注損傷模型，隨機分成三個實驗組（每組10只）：假手術組（Sham組)、心肌缺血再灌注損傷組(I/R組)、心肌缺血再灌注損傷組+遠端肢體缺血后處理組

2、(即I/R組+RLIPOC組,簡稱RLIPOC組）。I/R組和RLIPOC組的大鼠開胸后采用6-0絲線結扎冠狀動脈左前降支（LAD)，Sham組只穿線不結扎，I/R組和RLIPOC組的大鼠結扎LAD使大鼠左心室局部心肌缺血30 min，再開放LAD使心肌血流恢復灌注120 min的處理。且RLIPOC組在心肌缺血15min時,對大鼠左下肢進行捆綁實施10 min缺血后再恢復左下肢血流灌注。實驗過程中連續(xù)監(jiān)測大鼠的心率（HR)及Ⅱ?qū)?lián) E

3、CG變化，記錄缺血期和再灌注期的心律失常發(fā)生情況并進行評分。于大鼠頸內(nèi)靜脈分別在心肌缺血前和再灌注120min時抽取血標本，檢測血清肌酸激酶心肌型同工酶（CK-MB)、肌酸激酶（CK）、乳酸脫氧酶（LDH)的濃度。在再灌注120min末取心臟做HE染色觀察心肌組織形態(tài)學改變，以及透射電鏡觀察心肌細胞內(nèi)線粒體等超微結構的改變。
　　結果：1.與 Sham組相比，I/R組、RLIPOC組缺血期和再灌注期的心律失常發(fā)生率顯著增多，心律失

4、常評分明顯升高。與I/R組相比，RLIPOC組在再灌注60min內(nèi)發(fā)生心律失常的數(shù)目減少，心律失常的評分明顯降低（3.44±0.53 VS1.63±0.92，P<0.01），差異有統(tǒng)計學意義。
　　2.在缺血前，各實驗組的血清CK-MB、CK、LDH濃度無顯著差異（CK-MB:Sham組200.19±30.02U/L，I/R組216.49±15.92U/L，RLIPOC組194.90±46.33U/L；CK：Sham組819.07

5、±177.02U/L，I/R組788.22±151.04U/L，RLIPOC組746.36±132.84U/L；LDH：Sham組111.20±9.36U/L，I/R組120.20±15.83U/L，RLIPOC組146.25±21.23U/L；P>0.05）。在再灌注120min后，與Sham組相比，I/R組、RLIPOC組血清CK-MB、CK、LDH濃度顯著升高（CK-MB:Sham組203.55±32.25U/L，I/R組1229

6、.57±92.03U/L，RLIPOC組610.17±89.18U/L；CK：Sham組789.68±144.66U/L，I/R組11600.67±875.84U/L，RLIPOC組5443.98±821.97U/L；LDH：Sham組119.00±19.92U/L，I/R組1039.43±70.55U/L，RLIPOC組665.83±77.98U/L；P<0.05)。在再灌注120min后，RLIPOC組與I/R組相比，血清CK-MB

7、、CK、LDH濃度明顯降低(P<0.05)。
　　3.在再灌注120min末取心肌做HE染色可見，與Sham組相比，I/R組心肌組織呈區(qū)域性壞死，肌纖維腫脹明顯并排列紊亂，肌絲斷裂溶解；間質(zhì)充血、水腫，有大量中性粒細胞浸潤，血管明顯擴張；心肌細胞體積明顯增大,呈空泡樣變性，核固縮甚至碎裂。與I/R組相比，RLIPOC組肌纖維排列較整齊，肌纖維輕度腫脹，肌絲部分斷裂溶解；間質(zhì)部分水腫，中性粒細胞浸潤減少；心肌細胞體積輕度增大,少數(shù)呈

8、空泡樣變性，核部分固縮。在灌注120min末做透射電鏡下可見,I/R組：細胞核明顯改變，核膜皺縮甚至破裂，染色質(zhì)濃縮，分布雜亂；肌節(jié)各帶的結構消失，肌絲斷裂，Z線增粗；線粒體腫脹，空泡樣變性，呈絮狀改變，嵴松散，有電子致密顆粒沉積。RLIPOC組：細胞核膜完整；肌節(jié)各帶的結構比較清晰，肌絲排列基本整齊規(guī)則，無明顯斷裂；線粒體輕度腫脹，無明顯空泡形成，呈勻質(zhì)樣改變，嵴較密集。
　　結論：1.RLIPOC降低大鼠心肌再灌注期間室性心律