鹽酸法舒地爾預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理對(duì)離體大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、背景和目的
　　心肌缺血后盡早對(duì)缺血區(qū)進(jìn)行血液再灌注是阻止心肌細(xì)胞死亡的唯一有效途徑。然而，再灌注本身會(huì)加重并擴(kuò)大缺血后心肌細(xì)胞損傷，即發(fā)生心肌缺血再灌注損傷。既往研究表明，藥物預(yù)處理和缺血后處理，均可明顯減輕心肌缺血再灌注損傷。缺血后處理與缺血預(yù)處理相比更具有可操作性，目前已進(jìn)入臨床研究階段。
　　Rho激酶是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，Rho/Rho激酶信號(hào)通路是體內(nèi)普遍存在的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之一，它參與多種生物學(xué)行為，并且

2、介導(dǎo)了多種心腦血管疾病的發(fā)生機(jī)制。Rho激酶抑制劑鹽酸法舒地爾是一種新型的鈣離子拮抗劑，起初是用于治療蛛網(wǎng)膜下腔出血后的腦血管痙攣及伴隨的腦缺血癥狀，有研究發(fā)現(xiàn)Rho激酶在缺血心肌中被異常激活，這提示Rho激酶的異常激活可能與缺血引起的心肌損傷密切相關(guān)。近年來(lái)Rho/Rho激酶信號(hào)途徑在心肌缺血再灌注損傷的作用機(jī)制成為研究的熱點(diǎn)，陸續(xù)有研究顯示法舒地爾對(duì)缺血性心臟疾病有治療作用。亦有研究報(bào)道指出大劑量鹽酸法舒地爾預(yù)處理能發(fā)揮類似缺血預(yù)處

3、理樣的心臟保護(hù)作用，但其確切的發(fā)生機(jī)制尚不明確。
　　本研究的目的:1）驗(yàn)證缺血后處理和鹽酸法舒地爾預(yù)處理在離體大鼠心肌缺血再灌注模型下的心肌保護(hù)作用;2）觀察并比較鹽酸法舒地爾預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理分別與預(yù)處理、缺血后處理單一處理組對(duì)離體大鼠心肌缺血再灌注的影響有無(wú)差異;3）探討鹽酸法舒地爾在預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理干預(yù)時(shí)減輕心肌缺血再灌注損傷的相關(guān)作用機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法
　　60只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為6組（各組

4、10只）:1）對(duì)照(Control)組:行30min不完全缺血（冠脈灌流量減到原灌流量的5％）和120min再灌注處理。2）缺血后處理(IPO)組:和對(duì)照組一樣，但是在再灌注開(kāi)始時(shí)給予6個(gè)循環(huán)的短暫的10s灌注(R)/10s缺血(I)。3)小劑量法舒地爾預(yù)處理(LF)組:和對(duì)照組一樣，但是在缺血前15min給予含有1μmol/L法舒地爾的KH液灌注。4）大劑量法舒地爾預(yù)處理(HF)組:和第3組一樣，但法舒地爾的濃度為10μmol/L。5

5、）小劑量法舒地爾預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理(LF+IPO)組:和對(duì)照組一樣，但是在缺血前15min給予含有1μmol/L法舒地爾的KH液灌注，在再灌注開(kāi)始時(shí)給予6次10s的灌注/缺血循環(huán)。6）大劑量法舒地爾預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理(HF+IPO)組:和第5組一樣，但法舒地爾的濃度為10μmol/L。本實(shí)驗(yàn)采用Langendorff離體心臟流灌裝置，制備心肌缺血再灌注模型，記錄各組血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)(HR、LVDP、±dp/dtmax)，測(cè)定冠脈灌流液

6、中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量，測(cè)定心肌梗死面積，對(duì)所記錄的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果
　　1、IPO、HF、LF+IPO、HF+IPO組較Control組的HR、LVDP、±dp/dtmax明顯升高（P均＜0.05），均能改善缺血后心功能;特別是HF+IPO組，較IPO、HF組的HR、LVDP、±dp/dtmax明顯升高（P均＜0.05），可顯著改善缺血后心功能。
　　2、IPO、HF、LF+I

7、PO、HF+IPO組與Control組相比，均能增加SOD含量（P均＜0.01）、降低MOD水平（P均＜0.01）;HF+IPO組較HF、IPO組能顯著增加SOD含量、降低MOD水平，從而進(jìn)一步減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的損傷（P均＜0.01）。
　　3、IPO、HF、LF+IPO、HF+IPO組的心肌梗死面積分別為34.8％±4.1％、32.1％±3.7％、35.6％±3.3％、24.2％±2.8％，與Control組45.6％±6.5

8、％相比，均能縮小心梗范圍（P均＜0.01）;HF+IPO組分別與HF、IPO組相比，能進(jìn)一步縮小心肌梗死面積（P均＜0.05）。
　　結(jié)論
　　1、在我們的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，大劑量?0umol/L）的法舒地爾預(yù)處理具有和缺血后處理一樣減輕心肌缺血再灌注損傷的作用;且鹽酸法舒地爾預(yù)處理對(duì)心肌保護(hù)作用可能存在一定程度的劑量依賴性。
　　2、大劑量(10umol/L)法舒地爾預(yù)處理聯(lián)合缺血后處理能顯著減輕心肌缺血再灌注損傷，而小