Wnt-β-catenin信號(hào)通路在人膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：通過檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的關(guān)鍵因子β-catenin、TCF-4及其拮抗劑 sclerostin在原發(fā)性膝骨關(guān)節(jié)炎患者的不同退變程度脛骨平臺(tái)的軟骨下骨中的表達(dá)，探討Wnt/β-catenin信號(hào)通路在OA發(fā)病及病情進(jìn)展的作用。
　　方法：標(biāo)本取自2013年-2014年接受人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)的原發(fā)性膝骨關(guān)節(jié)炎患者自愿捐獻(xiàn)的新鮮內(nèi)側(cè)或外側(cè)脛骨平臺(tái)組織，共45例標(biāo)本。大體觀察后在中央負(fù)重區(qū)取材，沿冠狀面將組織塊切

2、分為兩份，一份帶有軟骨及軟骨下骨，常規(guī)制備脫鈣石蠟切片，行番紅 O-固綠染色，觀察組織病理形態(tài)；參照改良 Mankin評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行退變嚴(yán)重程度分組，分為OA早期、OA中期、OA晚期三組；應(yīng)用Image Pro Plus6.0圖像分析軟件測(cè)量軟骨和軟骨下骨結(jié)構(gòu)參數(shù)，包括軟骨全層（total articular cartilage，TAC）厚度、軟骨下骨板（subchondral bone plate，SCP）厚度以及骨小梁體積分?jǐn)?shù)（

3、trabecular bone volume，BV/TV）；行免疫組化染色檢測(cè)β-catenin、sclerostin在軟骨下骨骨細(xì)胞中的表達(dá)情況。另一份剔除軟骨組織，對(duì)軟骨下骨組織行Western blot，檢測(cè)軟骨下骨中β-catenin、TCF-4及sclerostin的表達(dá)情況；行RT-PCR，檢測(cè)軟骨下骨中β-catenin、TCF-4及SOST的mRNA表達(dá)情況，用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件分析各因子在各組中的表達(dá)差異。<

4、br>　　結(jié)果：（1）根據(jù)Mankin評(píng)分結(jié)果，在45例標(biāo)本中，OA早期組15例，OA中期組13例，OA晚期組17例。軟骨和軟骨下骨結(jié)構(gòu)參數(shù)測(cè)定顯示：隨著OA病理分期加重，TAC逐漸減少，SCP逐漸增厚，BV/TV逐漸增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（2）免疫組化顯示，β-catenin及sclerostin在OA早期組、OA中期組、OA晚期組軟骨下骨的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），β-catenin表達(dá)與Mankin評(píng)分

5、呈正相關(guān)，sclerostin表達(dá)與Mankin評(píng)分呈負(fù)相關(guān)。(3)Western blot顯示，β-catenin、TCF-4及sclerostin在OA早期組、OA中期組、OA晚期組軟骨下骨的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。（4）RT-PCR顯示，β-catenin、TCF-4及SOST的mRNA在OA早期組、OA中期組、OA晚期組軟骨下骨的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；β-catenin、TCF-4的mRNA表達(dá)與Manki