Wnt-β-catenin信號通路在人膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨中的表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過檢測Wnt/β-catenin信號通路的關(guān)鍵因子β-catenin、TCF-4及其拮抗劑 sclerostin在原發(fā)性膝骨關(guān)節(jié)炎患者的不同退變程度脛骨平臺的軟骨下骨中的表達,探討Wnt/β-catenin信號通路在OA發(fā)病及病情進展的作用。
  方法:標本取自2013年-2014年接受人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)的原發(fā)性膝骨關(guān)節(jié)炎患者自愿捐獻的新鮮內(nèi)側(cè)或外側(cè)脛骨平臺組織,共45例標本。大體觀察后在中央負重區(qū)取材,沿冠狀面將組織塊切

2、分為兩份,一份帶有軟骨及軟骨下骨,常規(guī)制備脫鈣石蠟切片,行番紅 O-固綠染色,觀察組織病理形態(tài);參照改良 Mankin評分標準對標本進行退變嚴重程度分組,分為OA早期、OA中期、OA晚期三組;應(yīng)用Image Pro Plus6.0圖像分析軟件測量軟骨和軟骨下骨結(jié)構(gòu)參數(shù),包括軟骨全層(total articular cartilage,TAC)厚度、軟骨下骨板(subchondral bone plate,SCP)厚度以及骨小梁體積分數(shù)(

3、trabecular bone volume,BV/TV);行免疫組化染色檢測β-catenin、sclerostin在軟骨下骨骨細胞中的表達情況。另一份剔除軟骨組織,對軟骨下骨組織行Western blot,檢測軟骨下骨中β-catenin、TCF-4及sclerostin的表達情況;行RT-PCR,檢測軟骨下骨中β-catenin、TCF-4及SOST的mRNA表達情況,用SPSS20.0統(tǒng)計分析軟件分析各因子在各組中的表達差異。<

4、br>  結(jié)果:(1)根據(jù)Mankin評分結(jié)果,在45例標本中,OA早期組15例,OA中期組13例,OA晚期組17例。軟骨和軟骨下骨結(jié)構(gòu)參數(shù)測定顯示:隨著OA病理分期加重,TAC逐漸減少,SCP逐漸增厚,BV/TV逐漸增加,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)免疫組化顯示,β-catenin及sclerostin在OA早期組、OA中期組、OA晚期組軟骨下骨的表達有統(tǒng)計學差異(P<0.05),β-catenin表達與Mankin評分

5、呈正相關(guān),sclerostin表達與Mankin評分呈負相關(guān)。(3)Western blot顯示,β-catenin、TCF-4及sclerostin在OA早期組、OA中期組、OA晚期組軟骨下骨的表達有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。(4)RT-PCR顯示,β-catenin、TCF-4及SOST的mRNA在OA早期組、OA中期組、OA晚期組軟骨下骨的表達有統(tǒng)計學差異(P<0.05);β-catenin、TCF-4的mRNA表達與Manki

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