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文檔簡介
1、目的:觀察蛋白激酶B(AKT)與細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)在正常和骨性關節(jié)炎(OA)軟骨細胞中的表達,探討AKT與ERK1/2在OA病程中的意義。
方法:手術中取18例OA人膝關節(jié)軟骨組織(患者年齡60-78歲)和5例正常關節(jié)軟骨組織(患者年齡23-40歲),培養(yǎng)人軟骨細胞,并甲苯胺藍染色、免疫組化鑒定與觀察聚集蛋白聚糖及Ⅱ型膠原在正常與OA軟骨細胞中的表達; Western blotting技術檢測AKT、p-
2、AKT、ERK1/2、p-ERK1/2、磷酸化核糖體S6蛋白激酶(p-P70S6K)及增殖細胞核抗原(PCNA)蛋白在正常/OA軟骨細胞中表達水平;實時定量PCR技術檢測聚集蛋白聚糖及Ⅱ型膠原在正常/OA軟骨細胞中mRNA表達水平;包埋制備切片,免疫組織化學技術觀察p-AKT及p-ERK1/2在OA與正常軟骨組織中的表達。
結果:與正常軟骨細胞比較,OA軟骨細胞內(nèi)p-AKT、p-P70S6K蛋白表達明顯降低(P<0.05),且
3、聚集蛋白聚糖及Ⅱ型膠原mRNA在OA軟骨細胞中的表達水平降低(P<0.05),而p-ERK1/2、PCNA蛋白表達明顯提高(P<0.05)。同時,p-AKT在OA軟骨組織中整體表達水平低于正常軟骨組織(P<0.05);而p-ERK1/2在OA軟骨組織中整體表達水平高于正常軟骨組織(P<0.05)。
結論:AKT可能通過p-P70S6K而調(diào)節(jié)OA軟骨細胞外基質(zhì)聚集蛋白聚糖及Ⅱ型膠原的合成;ERK1/2可能通過PCNA而調(diào)控OA軟
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