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文檔簡介
1、本研究的目的是提取、分離和純化海洋生物Ⅰ號抗腫瘤活性組分,探討各組分對人Burkitt's淋巴瘤Raji細胞和人高分化鼻咽癌CNEl細胞兩種細胞系的作用。 [方法]乙醇冷浸漬法提取,石油醚、乙酸乙酯和正丁醇系統(tǒng)溶劑分離,大孔吸附樹脂柱層析法進一步純化分離;MTT法測定各提取物對Raji、CNEl兩種細胞系的生長抑制作用;細胞計數(shù)法測定提取物對腫瘤細胞生長曲線的影響;流式細胞術(shù)檢測提取物對腫瘤細胞周期的影響。 [結(jié)果]海洋
2、生物Ⅰ號經(jīng)提取分離得到3種提取物A、B和C,提取率分別為0.17%、0.14%和0.4%??鼓[瘤活性測定結(jié)果顯示,3種提取物對Raji細胞和CNEl細胞生長均有不同程度的抑制作用,抑制率隨藥物濃度的增高而增高,其中提取物B作用最強,提取物C次之,提取物A作用最弱。統(tǒng)計結(jié)果顯示,12h、24h和48h3個時間點提取物B和提取物C的抑制率比較,差異具有顯著性(P<0.05);A和B、A和C的抑制率兩兩比較,差異具有非常顯著性(P<0.01)
3、。提取物A、B和C作用于Raji細胞48h后的IC50值分別為399.77μg/ml、193.61μg/ml和204.90μg/ml,作用于CNEl細胞的IC50值分別為804.14μg/ml、397.65μg/ml和611.94μg/ml。不同濃度的提取物B均使Raji細胞和CNE1細胞的生長曲線變?yōu)榈推?,各濃度組與空白對照組相比,差異具有非常顯著性(P<0.01)。流式細胞術(shù)測定結(jié)果顯示,不同濃度的提取物B均可以引起兩種細胞系G1期
4、細胞增多,S期細胞減少,并存在明顯的量效關(guān)系。大孔吸附樹脂柱層析法將提取物C進一步純化分離得到5個組分C1、C2、C3、C4和C5,提取率分別為46.92%、7.02%、3.57%、4.76%和8.57%??鼓[瘤活性測定結(jié)果顯示,C1、C2和C3組分對Raji和CNE1細胞的生長抑制作用不明顯,而C4和C5組分對兩種細胞系的生長均有顯著的抑制作用,C5組分的抑制作用最強,且抑制率隨藥物濃度的增高而增高。C3和C2、C3和C1的抑制率差異
5、不大;其他的兩組間的比較,差異具有非常顯著性(P<0.01)。C1、C2、C3、C4和C5組分作用于Raji細胞48h后的IC50值分別為272.27μg/ml、8729.28μg/ml、3793.82μg/ml、113.49μg/ml和78.59μg/ml,作用于CNE1細胞48h后的IC50值分別為1675.27μg/ml、4021.66μg/ml、557.08μg/ml、181.31μg/ml和91.84μg/ml。 [結(jié)
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